[发明专利]一种L‑茶氨酸硒螯合物及制备方法和含该螯合物的含片及制备方法

权利要求书

1.一种L-茶氨酸硒螯合物的制备方法，其特征在于，以L-茶氨酸和硒盐为原料，以pH值为7-10的缓冲液为反应介质构成反应体系，在70-90℃下混合，反应完全后将反应液分离纯化，获得L-茶氨酸硒螯合物；

所述L-茶氨酸与硒盐溶液质量比为(3-1)：1；所述的L-茶氨酸由枯草芽孢杆菌发酵所产的γ-谷氨酰转肽酶，以L-谷氨酰胺和乙胺盐酸盐为底物发酵制备得到。

2.根据权利要求1所述的一种L-茶氨酸硒螯合物的制备方法，其特征在于，所述L-茶氨酸硒螯合物具体制备步骤如下：

步骤1，合成L-茶氨酸原料液；

步骤2，将L-茶氨酸原料液脱色过滤后，滤液备用；

步骤3，在滤液中加入滤液质量浓度为35％的硒盐水溶液；用氢氧化钠调节至pH值为7-10，氮气吹扫，于70-90℃下进行2h螯合反应；

步骤4，螯合反应结束后，自然冷却至室温，进行纯化；将所得螯合液浓缩至原体积1/3-1/6，加入5-8倍体积浓度95％乙醇水溶液，沉淀静置8-15h，除去上清液，将沉淀用95％的乙醇洗涤抽滤多次，取滤饼干燥后得到L-茶氨酸硒螯合物。

3.根据权利要求2所述的一种L-茶氨酸硒螯合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤1的具体步骤如下，

1.1将枯草芽孢杆菌接种在平板培养基上，在37℃下静置培养16h进行一次活化后，再转接到液体培养基上进行二次活化；将经两次活化好的枯草芽孢杆菌二级种子液按体积分数3％接种量转接于30mL发酵培养液中，置于恒温培养箱中37℃振荡培养12-16h；

1.2收集振荡培养的发酵液离心后得γ-谷氨酰转肽酶粗酶液；采用分光光度计测定酶活，选取酶活0.01U/mL-0.2U/mL的粗酶液备用，进行催化反应；

1.3分别加入粗酶液质量10％的L-谷氨酰胺和粗酶液质量10％的乙胺盐酸盐溶液进行催化反应，L-谷氨酰胺的浓度为15-50mmol/L，乙胺盐酸盐的浓度为20-80mmol/L；用乙胺水调节催化反应体系至pH值为10，37℃静置培养5-8h，合成L-茶氨酸，得到L-茶氨酸原料液。

4.根据权利要求3所述的一种L-茶氨酸硒螯合物的制备方法，其特征在于，步骤2中，加入L-茶氨酸原料液重量2％的活性炭进行吸附脱色，反应过程温度为60-80℃，反应时间为3-8min。

5.根据权利要求1所述的一种L-茶氨酸硒螯合物的制备方法，其特征在于，所述硒盐为亚硒酸钠。

6.一种由权利要求1-5任意一项所述的方法制备得到的L-茶氨酸硒螯合物。

7.一种含L-茶氨酸硒螯合物的含片制备方法，其特征在于，按质量份数计，取粉末状的L-茶氨酸硒螯合物20-35％，β-环糊精5-20％，葡萄糖5-20％，蔗糖2-10％，柠檬酸1-3％，麦芽糊精5-20％，混合后按质量比例加入1％的硬脂酸镁，压片装袋，即得含L-茶氨酸硒螯合物的含片。

8.一种由权利要求7所述的方法制备得到含L-茶氨酸硒螯合物的含片。