[发明专利]一种快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片及其制备方法、检测方法

权利要求书

1.一种快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片，其特征在于包括下层底板(4)，珍珠纸(2)，上层薄膜组件(1)和蜡样芽孢杆菌特征显色液体培养基，所述珍珠纸(2)中间具有圆形凹槽(3)，所述圆形凹槽(3)内均匀分布有蜡样芽孢杆菌特征显色液体培养基。

2.根据权利要求1所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片，其特征在于所述蜡样芽孢杆菌特征显色液体培养基每100mL含有胰蛋白胨0.8～2.0g、牛肉浸出粉0.05～0.5g、氯化钠0.1～1.0g、磷酸二氢钾0.2～0.4g、磷酸氢二钾0.2～0.4g、冷水可溶性胶0.5～2.0g、抑菌剂混合物100～500IU/mL、显色酶解底物混合剂0.015～0.04g。

3.根据权利要求2所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片，其特征在于所述显色酶解底物混合剂由5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯、5-溴-6-氯-3-吲哚基-D-葡糖苷酸环己胺盐、4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸、5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸环己胺盐按重量比1:1:1:2混合组成。

4.根据权利要求2或3所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片，其特征在于所述抑菌剂混合物为重量比为2:2:1的多粘菌素B、卡那霉素、头孢克洛的混合物。

5.根据权利要求1所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片，其特征在于所述圆形凹槽(3)直径为50～65mm。

6.根据权利要求1所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片，其特征在于所述的测试片上层薄膜组件(1)上方粘贴有测试片标签(5)。

7.一种权利要求1～6任一项所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片的制备方法，包括如下步骤：

a.配制蜡样芽孢杆菌特征显色液体培养基：每100mL按照以下方式配制，称量胰蛋白胨0.8～2.0g、牛肉浸出粉0.05～0.5g、氯化钠0.1～1.0g、磷酸二氢钾0.2～0.4g、磷酸氢二钾0.2～0.4g、冷水可溶性胶0.5～2.0g，于烧杯中加蒸馏水100mL加热搅拌溶解，在121℃高压灭菌锅条件下灭菌15min，冷却至室温后，依次加入经过滤灭菌的抑菌剂混合物10000～50000IU及显色酶解底物混合剂0.015～0.04g，得到蜡样芽孢杆菌特征显色液体培养基，在0～4℃下冷藏备用；

b.各组件的前处理

上层薄膜组件(1)：在上层薄膜组件1的反面均匀敷上冷水可溶性凝胶，在正面贴上测试片标签(5)，送辐照处理，辐照剂量为2KGy，使用前紫外灭菌30min；

下层底板(4)和珍珠纸(2)：下层底板(4)与珍珠纸(2)采用不干胶粘贴贴合在一起后，送辐照处理，辐照剂量为2KGy，使用前紫外灭菌30min；

c.蜡样芽孢杆菌特征显色液体培养基添加：将步骤b中经紫外灭菌后的下层底板(4)和珍珠纸(2)结合部件水平放置在水平台面上，珍珠纸(2)中间圆形凹槽(3)开口向上，吸取1～3mL蜡样芽孢杆菌特征显色液体培养基添加于圆形凹槽(3)内，使培养基均匀分布，无菌条件下35～85℃烘干4h后，置于0～4℃的无菌冷藏箱内，备用；

d.组装测试片：将经上述步骤c后得到的测试片组件上贴上经步骤a处理后的上层薄膜组件(1)，具有测试片标签(5)的一面向上，即得到快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片。

8.一种权利要求1～6任一项所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片检测样品中蜡样芽孢杆菌的方法，包括以下步骤：

a.样品前处理；

b.用权利要求1～6任一项所述的快速检测蜡样芽孢杆菌的测试片进行接菌培养；

c.分析检测结果。