[发明专利]一种新型果糖基肽氧化酶及其应用有效
申请号: | 201710046116.2 | 申请日: | 2017-01-22 |
公开(公告)号: | CN108342370B | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 杨广宇;谢渊;冯雁;马富强 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/53;C12P21/00;G01N33/72;G01N33/573 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 徐迅;马莉华 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 果糖 氧化酶 及其 应用 | ||
1.一种热稳定性提高的果糖基肽氧化酶,其特征在于,所述果糖基肽氧化酶与SEQ IDNO:2相比存在突变,所述的突变选自以下任一项:
第30位丝氨酸被精氨酸取代;或
第60位甘氨酸被丝氨酸取代;或
第66位甘氨酸被天冬氨酸取代;或
第95位异亮氨酸被亮氨酸取代;或
第138位丙氨酸被缬氨酸或异亮氨酸取代;或
第161位丙氨酸被天冬氨酸取代;或
第184位甘氨酸被天冬氨酸取代;或
第272位天冬酰胺被天冬氨酸取代;或
第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第30位丝氨酸被精氨酸取代和第66位甘氨酸被天冬氨酸取代;或
第66位甘氨酸被天冬氨酸取代和第95位异亮氨酸被亮氨酸取代;或
第161位丙氨酸被天冬氨酸取代和第138位丙氨酸被异亮氨酸取代;或
第161位丙氨酸被天冬氨酸取代和第272位天冬酰胺被天冬氨酸取代;或
第30位丝氨酸被精氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第161位丙氨酸被天冬氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第184位甘氨酸被天冬氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第272位天冬酰胺被天冬氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第66位甘氨酸被天冬氨酸取代、第161位丙氨酸被天冬氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第161位丙氨酸被天冬氨酸取代、第272位天冬酰胺被天冬氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第66位甘氨酸被天冬氨酸取代、第161位丙氨酸被天冬氨酸取代、第272位天冬酰胺被天冬氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代;或
第66位甘氨酸被天冬氨酸取代、第138位丙氨酸被异亮氨酸取代、第161位丙氨酸被天冬氨酸取代、第272位天冬酰胺被天冬氨酸取代和第388位组氨酸被酪氨酸取代。
2.一种多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸编码如权利要求1所述的果糖基肽氧化酶。
3.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体包含有权利要求2所述的多核苷酸。
4.一种基因工程化的细胞,其特征在于,所述的细胞包括权利要求3所述的表达载体或其基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。
5.一种提高果糖基肽氧化酶热稳定性的方法,其特征在于,使用了如权利要求1所述的果糖基肽氧化酶。
6.如权利要求1所述的果糖基肽氧化酶在美德拉化合物氧化脱糖反应中应用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的美德拉化合物为糖化血红蛋白及其蛋白酶解衍生物。
8.一种测量糖化血红蛋白的试剂盒或传感器,其中包含了如权利要求1所述的果糖基肽氧化酶。
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