[发明专利]可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及水产养殖，尤其是涉及一种可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末及其制备方法。

背景技术

抗生素应用在畜牧业产生了巨大的经济效益。但抗生素的大量使用所伴随的负面效应也日益突出，主要表现为病原微生物的耐药性的产生以及药物在动物体内的残留，从而对人类的健康产生直接或者潜在的危害。抗生素在饲料中的应用遇到严峻的挑战。以及目前我国饲料改善肉蛋白品质通过化学药品的方法逐步引起人们的忧虑，如苏丹红，瘦肉精等违禁药物的添加及抗生素的过量添加来改善肉蛋品质等层出不穷，对食品安全造成威胁。开发安全无毒绿色的生物饲料添加剂来改善肉品质是目前畜牧业发展的趋势。因此抗生素替代品(微生态制剂等)的研究开发成为近年来绿色饲料添加剂的热点，其中植物乳杆菌的应用备受关注。植物乳杆菌是农业部批准认可用于饲料添加剂的菌种，其特征是产酸、产酶的抑制肠道病原菌的作用。植物乳杆菌通过改善动物肠道的微生态环境和提高动物的免疫力而提高动物的生产性能，而且在动物产品中无残留。但是采用传统的碳氮源优化的方法能使乳杆菌达到10⁹CFU/ml后，再提高碳氮源含量后很难进一步提高菌体含量。市售乳酸球菌保持活力较长，而乳酸杆菌产品保质期较短，但杆菌有不同于球菌的特殊的生理活性。

本申请人在中国专利CN103497906A中公开一种微生态制剂及其制备方法与应用，涉及水产养殖。微生态制剂含有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌中的至少一种和植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌中的至少一种；

植物乳杆菌包括：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)1A07806，保藏编号CCTCC NO:M 2013293；

嗜酸乳杆菌包括：嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)PL7，保藏编号CCTCC NO:M 2013294。

在制备促进对虾或石斑鱼生长，提高对虾或石斑鱼免疫力和抗病力，防治病害，提高存活率，净化养殖水质制剂中应用。

发明内容

本发明目的在于针对当前抗生素滥用的情况，提供可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末及其制备方法。

本发明的另一目的在于提供所述可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末的应用。

所述可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末含有：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)1A07806和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)PL7及其微囊外壁。

所述微囊外壁可采用水溶性食用胶、环状糊精、纤维素衍生物、明胶、酪蛋白等中的至少两种作为微囊外壁，所述微囊外壁可通过微囊制粒机对样品进行乳化、混合、造粒、干燥，制备成包埋着乳酸菌体的微囊外壁，制成可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末。

所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)1A07806的保藏编号为CCTCC NO：M2013293；

所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)PL7的保藏编号为CCTCC NO：M2013294。

所述可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末的制备方法包括以下步骤：

1)配制种子培养基500ml，灭菌；

2)将冻存的菌种活化划线于相应的平板，再将活化后的单克隆接种于种子培养基培养；

3)配制发酵培养基，将50L发酵培养基作为一级种子培养基，加入低聚果糖或海藻糖中的一种作为促进乳酸菌生长剂，灭菌；

4)将步骤2)培养获得的初级活化种子接种于50L一级种子培养基中培养，再通过移种管接种于1000L发酵培养基中培养，活菌数≥8×10⁹CFU/mL；

5)发酵结束后，管式离心机离心收集菌体，得菌泥；

6)将步骤5)获得的菌泥添加维生素C、海藻糖、淀粉糊精、低聚果糖等中的至少两种作为保护剂，混合均匀后，再平铺于样品冻干机的样品板，并将菌泥分成小块；

7)将步骤6)获得的植物乳杆菌粉末与维生素C、葡萄糖、淀粉混合，采用水溶性食用胶、环状糊精、纤维素衍生物、明胶、酪蛋白等中的至少两种作为微囊外壁，通过微囊制粒机对样品进行乳化、混合、造粒、干燥，制备成包埋着乳酸菌体的可长期保存的水产养殖用复合乳酸杆菌粉末。

在步骤1)中，所述灭菌的温度可为115℃，灭菌的时间可为30min。

在步骤2)中，所述培养可静置培养18h。