[发明专利]一种氧化葡聚糖包被的四氧化三铁磁性纳米材料的定量检测方法

说明书

本发明公开了一种氧化葡聚糖包被的四氧化三铁磁性纳米材料的定量检测方法，利用了二抗放大了检测信号，提高了实验分析的灵敏度，即通过测量氧化葡聚糖包被的四氧化三铁(Fe₃O₄@O‑dextran)包被抗原、Fe₃O₄@O‑dextran抗体即一抗与HRP标记的羊抗兔抗体即二抗，三者复合物的光学性号达到定量检测Fe₃O₄@O‑dextran的目的，该方法操作简单，可行性高，灵敏度高，检出限低，可实现高通量检测。

技术领域

本发明涉及纳米材料的定量检测领域，具体涉及一种氧化葡聚糖包被的四氧化三铁磁性纳米材料的定量检测方法。

背景技术

纳米材料通常定义为具有非常小的组分和/或结构特征(例如颗粒和纤维)，其中至少一个尺寸在1～100nm范围内。纳米材料由于其尺寸处于纳米级别，与传统的材料相比具有优异的光学、热学、磁学、力学等性质。纳米材料的特殊性质，决定了纳米材料将有广泛的应用前景。

磁性纳米材料作为纳米材料中的一类特殊材料，不仅具有纳米材料的特殊性质，还具有其它纳米材料所不具有的性质——磁性。目前，磁性材料已经广泛的应用到各个领域，如生物医学应用、工业技术应用、环境治理应用等，特别是生物医学上的应用，磁性纳米材料可以作为磁共振成像的造影剂、药物载体以及磁性分离和纯化等。

近年来，人类饱受着各种疾病的折磨。如心血管疾病、糖尿病以及各种癌症。据世界卫生组织发布的《全球癌症报告2014》预测，全球癌症病例将呈现迅猛增长态势，将由2012年的1400万人，逐年递增至2025年的1900万人，到2035年，将可能达到2400万人。其中，报告显示，2012年全球新病例有一半发生在亚洲，其中大部分发生在中国。

传统的治疗癌症的主要手段是外科手术、放射疗法和化学疗法。其中化学疗法是非常普遍的一种治疗手段。化学疗法主要是利用抗癌药物抑制癌细胞的增长，从而达到治疗的效果。但是，抗癌药物在抑制癌细胞增长的同时也会对正常的组织细胞造成一定的伤害，故提高抗癌药物的靶向性对于减少抗癌药物的副作用，提高药效是十分必要的。

磁性纳米材料可以作为药物载体将药物靶向作用于病变部位，实现对癌症等疾病的有效治疗，但是纳米载体在应用时，其剂量尤为重要，不同的剂量可能导致不同效果或者副作用，准确的剂量对于优化纳米药物的功效是十分重要的，同时可以最大程度减小材料的毒性。

传统的对纳米材料的成分的分析方法主要有原子吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱、电感耦合等离子体质谱法、X射线荧光光谱法、电子探针分析法等；纳米材料的结构分析方法主要有X射线衍射法、激光拉曼物相分析等；纳米材料的形貌和粒度分析主要有透射电子显微镜法、扫描电子显微镜法、激光粒度仪等；纳米材料表面与界面分析常用方法主要有X射线光电子能谱、俄歇电子能谱、静态二次离子质谱、离子散射谱等。其中原子吸收光谱适合对纳米材料中痕量金属杂质进行定量测定，但对非金属元素、难熔元素测定难。

这些传统的纳米材料的分析方法未能够很好的实现对纳米材料的定量分析。此外，2016年4月9-10日在厦门召开的全国环境纳米技术及生物效应学术研讨会上也有研究者提出了当前对于纳米材料的定量分析方法面临的挑战如：①生物体内纳米颗粒浓度1ppm；②靶器官纳米颗粒浓度ppb；③细胞中纳米颗粒浓度1ppt；④纳米颗粒/蛋白/DNA复合物等。故实现纳米材料的定量分析是一项非常有挑战性的工作，尤其是对于应用在生物医学上的纳米材料。

氧化葡聚糖包被的四氧化三铁(Fe₃O₄@O-dextran)具有许多优异的性能如良好的水溶性、生物相容性、靶向性、强磁性等，这些优异的性能决定了Fe₃O₄@O-dextran在生物医学上具有巨大的应用潜力，如磁共振造影剂、靶向药物载体等。

发明内容