[发明专利]一种与杨树抗逆基因表达调控相关的内参基因及其应用有效
| 申请号： | 201710036922.1 | 申请日： | 2017-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN106754965B | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 严涵薇;项艳;陈竹;刘欢龙 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12Q1/6895;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 合肥中谷知识产权代理事务所(普通合伙) 34146 | 代理人： | 洪玲 |
| 地址： | 230000 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 杨树 基因 表达 调控 相关 内参 及其 应用 | ||
1.一种与杨树抗逆基因表达调控相关的内参基因，其特征在于，所述内参基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种如权利要求1所述的内参基因在作为杨树非生物胁迫下抗逆相关基因实时荧光定量PCR检测中的应用。
3.根据权利要求2所述的一种内参基因在作为杨树非生物胁迫下抗逆相关基因实时荧光定量PCR检测中的应用，其特征在于，所述非生物胁迫包括盐胁迫和干旱胁迫。
4.一种定量分析如权利要求1所述的内参基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取杨树组织总RNA，并反转录成cDNA；
(2)以所述内参基因的特异性区域进行引物设计，获得实时荧光定量PCR引物：
SEQ ID NO.3：上游引物：AAACATTGGACGGGGTGCTC
SEQ ID NO.4：下游引物：CCCACATGAGGCTGGAGGAC
(3)以步骤(1)的cDNA为模板，利用步骤(2)的引物进行实时荧光定量PCR分析，其中，实时荧光定量PCR扩增反应体系为：1μL模板cDNA，1μL上游引物，1μL下游引物，10μL SYBRRPremix Ex TaqTM II,7μL无菌水；实时荧光定量PCR扩增反应程序为：95℃预变性30秒；95℃变性5秒，60℃退火18秒，72℃延伸15秒，39个循环；
(4)反应结束后，采集溶解曲线的荧光信号，利用Bio-Rad iQ5分析软件，根据溶解曲线导出Ct值，作为后续数据分析的基础。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于安徽农业大学，未经安徽农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710036922.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
