[发明专利]一种用于促进子宫内膜修复的胶原蛋白真皮材料及其制备方法有效
申请号: | 201710034240.7 | 申请日: | 2017-01-18 |
公开(公告)号: | CN106880871B | 公开(公告)日: | 2019-12-13 |
发明(设计)人: | 董佳桓;闫玉芳;王彬;郭松 | 申请(专利权)人: | 烟台正海生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A61L27/24 | 分类号: | A61L27/24;A61L27/36;A61L27/50 |
代理公司: | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅;白艳 |
地址: | 264000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 促进 子宫 内膜 修复 胶原 蛋白 真皮 材料 及其 制备 方法 | ||
1.一种胶原蛋白材料的制备方法,步骤如下:将胶原蛋白浸泡在多肽溶液中,即得到胶原蛋白材料;所述多肽包括胶原蛋白结合域、促进MSCs聚集域和位于二者之间的连接肽;
所述胶原蛋白结合域是TKKTLRT、CQDSETRTFY或WREPSFCALS;
所述促进MSCs聚集为IKVAV、STNPKVL、GRGDSPC或EPLQLKM。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述多肽的氨基酸序列为序列1或序列2或序列3。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:
所述多肽溶液的质量百分含量为0-0.5%,且不为0;
或所述多肽溶液和所述胶原蛋白的重量比为10:1-40:1;
或所述浸泡时间为0.5-8h或1-3h,所述浸泡的温度为4-30℃。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:
所述胶原蛋白按照包括如下步骤的方法制备:
1)将离体动物皮作为原料浸泡在强碱溶液中,得到碱处理后材料;
2)将所述碱处理后材料浸泡在磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液中,得到磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液处理后材料;
3)将所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液处理后材料浸泡在含有脂肪酶和表面活性剂的溶液中,得到脂肪酶处理后材料;
4)将所述脂肪酶处理后材料浸泡在含有弱碱和表面活性剂的溶液中,得到弱碱和表面活性剂处理后材料,即为胶原蛋白。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:
步骤1)中,所述强碱溶液的溶质为强碱,所述强碱为NaOH或KOH;
或步骤3)中,所述含有脂肪酶和表面活性剂的溶液的溶质为脂肪酶和表面活性剂;
所述脂肪酶为碱性脂肪酶;所述表面活性剂为曲拉通-100、吐温-80、吐温-100或吐温-10;
或步骤4)中,所述含有弱碱和表面活性剂的溶液的溶质为弱碱和所述表面活性剂;
所述弱碱为Na2CO3、NaHCO3、K2CO3或KHCO3;或,步骤1)中,所述强碱溶液的浓度为0.5-4mol/L;
或,步骤2)中,所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液的浓度为0.01-0.5mol/L,pH为4.1-5.9;
或,步骤3)中,所述含有脂肪酶和表面活性剂的溶液中,所述脂肪酶的浓度为5U/mL-20U/mL,所述表面活性剂的质量百分含量为0.01%-2%;
或,步骤3)中,所述含有脂肪酶和表面活性剂的溶液中,所述脂肪酶的浓度为10U/mL,所述表面活性剂的质量百分含量为0.15%-0.2%;
或步骤4)中,所述含有弱碱和表面活性剂的溶液中,所述弱碱的浓度为0.1-1mol/L,所述表面活性剂的质量百分含量为0.1%-2%;
或所述含有弱碱和表面活性剂的溶液中,所述弱碱的浓度为0.1-1mol/L,所述表面活性剂的质量百分含量为0.5%-1%。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:
步骤1)中,所述强碱溶液和所述原料的重量比为10:1-40:1;
或步骤2)中,所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钾水溶液和所述碱处理后材料的重量比为10:1-40:1;
或步骤3)中,所述含有脂肪酶和表面活性剂的溶液和所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钾水溶液处理后材料的重量比为10:1-40:1;
或步骤4)中,所述含有弱碱和表面活性剂的溶液和所述脂肪酶处理后材料的重量比为10:1-40:1;
或,步骤1)中,所述浸泡时间为1-3h,所述浸泡温度为4-20℃;
或步骤2)中,所述浸泡次数为3-5次,每次浸泡时间为10-60min,每次浸泡的温度为4-30℃;
或步骤3)中,所述浸泡的时间为0.5h-24h或1h-4h,所述浸泡的温度为10-30℃;
或步骤4)中,所述浸泡的时间为1h-48h或8-12h,所述浸泡的温度为10-30℃。
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