[发明专利]一种牛奶样品中二[4‑(氧化缩水甘油)苯基]甲烷的提取净化方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全领域，涉及牛奶样品中二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷有害物质的检测，特别是检测中牛奶样品的前处理方法。

背景技术

二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷作为一类外源性激素，越来越受到人们的关注。该化合物都具有与雌激素相类似的作用，可导致内分泌紊乱，性早熟等危害。由于自然环境或外包装材料中都可能含有该物质，从而导致它们迁移到牛奶当中的几率是非常大，因此它们对人体的健康威胁是巨大的。该物质熔点15℃(lit.)，密度1.19 g/mL at 25℃(lit.)，折射率n20/D 1.579(lit.)，分子结构式如下：

牛奶样品组分比较复杂，有害有机物含量极低，一般在ppm和ppb，而且还存在目标待测物的同系物、异构体、降解产物、代谢产物和轭合物影响，要想除去与目标物同时存在的杂质，减少色谱干扰峰，避免检测器和色谱柱污染，样品预处理十分重要，大约占工作量的70%左右。

现有关于脂肪、蛋白质含量较高的食品中二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷的检测主要集中在肉类样品，暂未见有关牛奶样品的检测，该类样品的预处理主要采用固相萃取法（SPE），预处理过程一般是为：叔丁基甲醚提取--提取液吹干--正己烷/水萃取--固相萃取相，如“高效液相色谱-串联质谱法同时测定肉类罐头中双酚-二缩水甘油醚”，赵晓亚等，色谱，2012年第30卷第10期；“石墨烯固相萃取-液相色谱-质谱联用法测定食品接触材料中9 种双酚-二环氧甘油醚的迁移量”，龚强等，食品与生物技术学报，2014 年第33卷第12期；“多壁碳纳米管固相萃取－高效液相色谱－串联质谱法测定食品接触材料中双酚－二环氧甘油醚的迁移量”，吴新华等，色谱，2010年第28卷第11期。这种预处理方法由于使用时间比较长，工艺比较成熟，但是也存在步骤繁琐，固相萃取柱造价高，溶剂消耗量大的缺点，科研人员一直在寻找更加高效的替代方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有脂肪含量较高的食品中二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷检测过程样品预处理过程繁琐、成本高的缺陷，提供了一种牛奶样品中二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷的提取净化方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

一种牛奶样品中二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷的提取净化方法，步骤如下：

（1）牛奶样品用甲酸乙腈溶液提取；

（2）向步骤（1）的提取液中加入无水硫酸镁和氯化钠，振荡，离心，得到上清液；

（3）向步骤（2）得到的上清液中加入N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶和无水硫酸镁，振荡，离心，得到提取净化的二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷样品。

优选地，步骤（1）中，所述甲酸乙腈溶液的甲酸浓度为0.1vt%。

优选地，步骤（1）采用超声提取，提取时间为10min。

优选地，步骤（2）中，所述无水硫酸镁和氯化钠的质量比为1:2。

优选地，步骤（3）中，所述N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶和无水硫酸镁的质量比为1:1:2.5。

一种检测牛奶样品中二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷含量的方法，步骤如下：

（1）牛奶样品用甲酸乙腈溶液提取；

（2）向步骤（1）的提取液中加入无水硫酸镁和氯化钠，振荡，离心，得到上清液；

（3）向步骤（2）得到的上清液中加入N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶和无水硫酸镁，振荡，离心，液体吹干，得到的二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷样品再用乙腈溶液溶解，滤膜过滤，得待测样品；

（4）待测样品采用带有荧光检测器的高效液相色谱仪检测，色谱柱为C₁₈柱，流动相采用水和浓度为0.1vt%的甲酸乙腈溶液，激发波长235nm，发射波长为305nm。

本发明的牛奶样品预处理过程简单快捷、效率高、溶剂消耗量小，符合绿色化学和环保化学的要求、花费较少、节省大量的人力物力，适合于牛奶样品中二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷的快速检测。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1是提取净化后二[4-(氧化缩水甘油)苯基]甲烷的色谱图。

具体实施方式