[发明专利]一种轮虫的筛选方法

说明书

本发明提供一种轮虫的筛选方法，涉及生物筛选技术领域；用于筛选有性生殖倾向最低的轮虫，包括：将多个目标轮虫品系分别稳定化增殖建立单克隆培养母种群，从其中选择带卵轮虫使其于环境密度≤0.1ind./ml的条件下生产F1代轮虫幼体，将F1代轮虫幼体放置于不同体积的轮虫培养液中单独培养；将各F1代轮虫产生的F2代幼体分别挑出单独培养，计算各F2代有性个体比率；将F2代有性个体比率和对应的F1代种群密度进行非线性拟合求得有性生殖阈密度；将多个目标轮虫品系的有性生殖阈密度进行比较，得有性生殖倾向最低的轮虫品系。该方法快速、精准的筛选有性生殖倾向最低的轮虫品系，从而节约生产成本，具有推广价值。

技术领域

本发明涉及生物筛选技术领域，且特别涉及一种轮虫的筛选方法。

背景技术

不论是海水鱼还是淡水鱼，在育苗及幼体培育期间，其开口活饵料主要选用轮虫。按照每尾育苗每天摄食20～50只轮虫来计算，1个生产5000万尾鱼苗的中小型育苗企业，每天对轮虫的需求量就需要达到15～25亿只，按照1：1的比例采收轮虫来计算，育苗单位每天需要生产25～50亿只轮虫。轮虫大多数品系为周期性孤雌繁殖，即其生活史由孤雌繁殖和有性繁殖两部分构成。通常情况下，轮虫通过高效的孤雌繁殖过程增加种群数量，但是在高密度养殖条件下，则启动有性繁殖，产生休眠卵来抵御不良环境条件。有性繁殖的产生大大限制了种群繁殖的效率，甚至有崩溃的危险，从而限制了轮虫的产量，所带来的是活饵料供应不足的问题。因此实际生产中需要得到有性生殖倾向低的轮虫品系扩大培养，而该筛选方法目前尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种轮虫的筛选方法，用于快速、精准的筛选有性生殖倾向最低的轮虫品系，从而解决高密度培养条件下轮虫的有性生殖所带来的轮虫饵料供应不足的问题，提高培养效率，节约生产成本，具有极佳的推广价值。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

本发明提出一种轮虫的筛选方法，用于筛选有性生殖倾向最低的轮虫，包括：

将多个目标轮虫品系分别于环境密度≤0.1ind./ml的条件下稳定化增殖2-4周，建立单克隆培养母种群，从单克隆培养母种群中选择带卵轮虫作为母体，使其于环境密度≤0.1ind./ml的条件下生产F1代轮虫幼体，将龄长<2h的F1代轮虫幼体分别放置于不同体积的轮虫培养液中单独培养，并使得各F1代轮虫在发育过程中经历稳定的种群密度，每天更换一次轮虫培养液。

将不同种群密度下培养的各F1代轮虫产生的F2代幼体分别挑出单独培养，计算各F1代轮虫种群对应的F2代有性个体比率。

将F2代有性个体比率和对应的F1代经历的种群密度进行非线性拟合，求得各F1代轮虫种群的有性生殖阈密度。

将多个目标轮虫品系的F1代轮虫种群的有性生殖阈密度进行比较，得有性生殖倾向最低的轮虫品系。

本发明较佳实施例提供的轮虫的筛选方法的有益效果是：通过多个目标轮虫品系分别于环境密度≤0.1ind./ml的条件下稳定化增殖以及于环境密度≤0.1ind./ml的条件下生产F1代幼体，有效控制母系效应对轮虫F1代以及F2代的影响，提高实验结果的可重复性。通过不同种群密度的F1代轮虫种群以及对应的F2代有性个体比率进行非线性拟合，求得各F1代轮虫种群的有性生殖阈密度；并通过比较多个目标轮虫品系的有性生殖阈密度，得到有性生殖阈密度值最高的，即有性生殖倾向最低的轮虫，并用于大批量培养，可显著提高生产种群的轮虫最大培养密度，有利于高密度集约化培养，从而节约生产成本。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。