[发明专利]一种生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物制药技术领域，涉及一种冻干原粉，具体涉及一种生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法。

背景技术

IMF(Immune Metabolic Factors免疫代谢因子,简称IMF)是一类以蛋白质、多肽峰物质为主要成分，并有少量核酸组成的生命活性物质。广泛分布于天然动物、植物细胞中。

目前，已经公开了从天然动物中提取IMF生命活性物质的相关报道，如专利名称：一种生物抗衰制剂的生产工艺(申请号：02127943.8，申请日：2002.11.29)。该专利制备的IMF生物抗衰制剂，虽然具有显著的延长人体寿命之效果，可以通过肌肉注射、静脉注射和皮下缓释控释包埋等使用方法，达到延长人体寿命的目的；但该专利方法获得的IMF生命活性物质的分子结构不稳定、分子活性不强等缺陷。

发明内容

本发明的目的是提供一种生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法，该IMF生物抗衰因子，属于绿色、纯天然制品，安全性高。并且可以通过注射、口服、化妆品方式应用于人体，发挥其生物抗衰作用。IMF生命活性物质其分子结构更加稳定、分子活性更强、生物抗衰老作用更全面。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法，包括以下步骤：

(1)将初生哺乳动物用无菌水冲洗干净；

(2)加无热源重蒸生理盐水，高速匀浆；

(3)在-20℃条件下，沉降分离，去掉结缔组织沉淀物；

(4)将上清液，在42℃、PH 4.5条件下，用4000单位/kg胰蛋白酶进行酶解90分钟，得水解液；

(5)将水解液通过分子量50000D膜进行超滤，去掉酶活性未透过物质，得透过液；

(6)将透过液用伯乐S-X3凝胶进行柱层析，用浓度2％磷酸氢二钠洗脱，分别在25～30分钟、45～50分钟分段分别用紫外线吸收方法指示收取蛋白质、多肽峰物质，得IMF峰物质；

(7)将各IMF峰物质混合均匀，用分子烙印技术对IMF峰物质进一步纯化，去除大分子非活性蛋白质，得纯化提取液；

(8)在纯化提取液中加入浓度75％乙醇，在5℃环境中存放过夜；目的在于保存IMF因子生物活性的同时，沉淀出IMF更高生物活性因子。

(9)次日离心收取沉淀物质，冷冻干燥，即得IMF冻干原粉。

进一步地，所述紫外线吸收方法中使用的紫外线吸收剂为0.5％苯并三氮唑。

所述步骤(7)具体步骤如下：

a、模版IMF多肽MIP制备:

功能单体丙烯酰胺4mmol，模版IMF多肽0.6mmol，溶剂四氢呋喃7mmol，交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯37mmol和引发剂偶氮二异丁腈20mg，置于玻璃试管中混和均匀，充氮气，抽出真空排除氧气后密封，60℃水浴恒温，聚合24h，得棒状体聚合物；将其粉碎，用75um筛分，用丙酮反复沉降，取下层粒度相近75um的颗粒，真空干燥，得IMF多肽MIP，备用；

b、高活性IMF多肽的提取:

称取混合均匀的IMF峰物质，与IMF多肽MIP以1:1重量比溶于5V、浓度25％甲醇，搅拌6h，加入20V丙酮，在5℃环境中存放过夜；次日离心收取沉淀物；沉淀物中加入5V、浓度5％冰醋洗脱吸附的IMF多肽，得纯化提取液。

本发明生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法具有以下的有益效果：

1、本发明制备的生物抗衰IMF冻干原粉，可以制成各种剂型，通过注射、口服、化妆品方式应用于人体，具有显著的延长人体寿命之效果，达到延长人体寿命的目的。也可加入食品(饮料、酒)中发挥抗衰老作用。

2、本发明IMF生物抗衰因子，属于绿色、纯天然制品，无毒、无副作用，对人体安全性高。

3、本发明制备的IMF生命活性物质其分子结构更加稳定、分子活性更强、生物抗衰老作用更全面。

4、本发明制备的生物抗衰IMF冻干原粉，工艺简单、原材料来源广泛，生产成本低，具有广阔的应用前景。

具体实施方式

实施例1

一种生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法，包括以下步骤：

(1)将初生的羊羔宰杀、去除皮毛及体内垃圾后，用无菌水冲洗干净；

(2)加6倍重量的无热源重蒸生理盐水，以12000rpm高速匀浆；

(3)在-20℃条件下，沉降分离，去掉结缔组织沉淀物；

(4)将上清液，在42℃、PH 4.5条件下，用4000单位/kg胰蛋白酶进行酶解90分钟，得水解液；