[发明专利]一种生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法在审
申请号: | 201710014978.7 | 申请日: | 2017-01-09 |
公开(公告)号: | CN106636282A | 公开(公告)日: | 2017-05-10 |
发明(设计)人: | 龚德钦;龚瑞 | 申请(专利权)人: | 龚德钦;龚瑞 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;A61K38/01;A61P39/06;A61K8/64;A61Q19/08;A23L2/38;A23L2/52;A23L33/18;C12G3/00 |
代理公司: | 海口翔翔专利事务有限公司46001 | 代理人: | 张耀婷 |
地址: | 570000 海南省海*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 衰老 imf 冻干原粉 制备 方法 | ||
1.一种生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将初生哺乳动物用无菌水冲洗干净;
(2)加无热源重蒸生理盐水,高速匀浆;
(3)在-20℃条件下,沉降分离,去掉结缔组织沉淀物;
(4)将上清液,在42℃、PH 4.5条件下,用4000单位/kg胰蛋白酶进行酶解90分钟,得水解液;
(5)将水解液通过分子量50000D膜进行超滤,去掉酶活性未透过物质,得透过液;
(6)将透过液用伯乐S-X3凝胶进行柱层析,用浓度2%磷酸氢二钠洗脱,分别在25~30分钟、45~50分钟分段分别用紫外线吸收方法指示收取蛋白质、多肽峰物质,得IMF峰物质;
(7)将各IMF峰物质混合均匀,用分子烙印技术对IMF峰物质进一步纯化,去除大分子非活性蛋白质,得纯化提取液;
(8)在纯化提取液中加入浓度75%乙醇,在5℃环境中存放过夜;
(9)次日离心收取沉淀物质,冷冻干燥,即得IMF冻干原粉。
2.如权利要求1所述的生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法,其特征在于:所述紫外线吸收方法中使用的紫外线吸收剂为0.5%苯并三氮唑。
3.如权利要求1所述的生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法,其特征在于,上述步骤(7)具体步骤如下:
a、模版IMF多肽MIP制备:
功能单体丙烯酰胺4mmol,模版IMF多肽0.6mmol,溶剂四氢呋喃7mmol,交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯37mmol和引发剂偶氮二异丁腈20mg,置于玻璃试管中混和均匀,充氮气,抽出真空排除氧气后密封,60℃水浴恒温,聚合24h,得棒状体聚合物;将其粉碎,用75um筛分,用丙酮反复沉降,取下层粒度5um的颗粒,真空干燥,得IMF多肽MIP,备用;
b、高活性IMF多肽的提取:
称取混合均匀的IMF峰物质,与IMF多肽MIP以1:1重量比溶于5V、浓度25%甲醇,搅拌6h,加入20V丙酮,在5℃环境中存放过夜;次日离心收取沉淀物;沉淀物中加入5V、浓度5%冰醋洗脱吸附的IMF多肽,得纯化提取液。
4.如权利要求1所述的生物抗衰老IMF冻干原粉的制备方法,其特征在于:所述IMF冻干原粉可以制成各种剂型,通过注射、口服、化妆品方式应用于人体。
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