[发明专利]人源化基因编辑哺乳动物的制备方法及其用途

权利要求书

1.一种从人源化基因编辑哺乳动物中产生人血清白蛋白的方法，所述方法包括：

制备所述非人哺乳动物的基因组，所述非人哺乳动物的基因组包含编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸，所述多聚核糖核酸可操作地连接到启动子多聚核糖核酸，其中，所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的或部分的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸，并且其中所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因的修饰；

获得源自非人哺乳动物的血液样品，并且

从所述血液样品中分离出所述人血清白蛋白；

并且，所述人源化基因编辑哺乳动物的基因组包含编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸，所述多聚核糖核酸可操作地连接到启动子多聚核糖核酸；

其中，所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的或部分的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸，并且

其中，所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因的修饰。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述修饰包括人血清白蛋白基因的密码子优化和/或所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括乳腺白蛋白基因的一个或多个内含子。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述修饰包括用非人类乳腺细胞优选的密码子替换80％或更少的人类密码子。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括人血清白蛋白基因或非人类乳腺白蛋白基因的内含子1和内含子2的至少一部分。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，人源化基因编辑哺乳动物的血液包括约8至30g/L的人血清白蛋白，通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，转基因猪的血液包括不低于16g/L的人血清白蛋白，通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定，并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，转基因猪的血液包括不低于8g/L的人血清白蛋白，通过使用BCG(溴甲酚绿)白蛋白检测所测定，并且其中所述的人源化基因编辑哺乳动物不表达部分的所述编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人源化基因编辑哺乳动物不表达全部的编码人源化基因编辑哺乳动物的内源性白蛋白的多聚核糖核酸。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述启动子多聚核糖核酸是非人类乳腺的白蛋白启动子。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物，奶牛，绵羊，山羊，或兔子。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述人源化基因编辑哺乳动物是猪类动物。

12.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:3或4和/或SEQ ID NO:5或6的多聚核糖核酸。

13.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸。

14.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括SEQ ID NO:7的多聚核糖核酸和SEQ ID NO:5或6和SEQ ID NO:3或4的多聚核糖核酸。

15.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述编码人血清白蛋白的多聚核糖核酸包括在所述人源化基因编辑哺乳动物中编码人血清白蛋白的SEQ ID NO:9，10，11或12的多聚核糖核酸。