[发明专利]一种支原体污染的处理方法

权利要求书

1.一种支原体污染的处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)获取待处理的细胞；

(2)用含10ug/mL环丙沙星的培养基培养所述待处理的细胞；

(3)定时更新所述培养基，并且使所述待处理的细胞的生长密度保持在50％-80％；

(4)检测不到支原体污染的情况之后停止使用所述培养基。

2.如权利要求1所述的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述定时更新所述培养基的方法采用如下任意一种：

每隔固定天数更新所述培养基；

每当所述细胞的生长密度达到所述第一预设密度时，更新所述培养基。

3.如权利要求2所述的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述第一预设密度为75％-85％。

4.如权利要求2所述的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述使所述细胞生长密度保持在50％-80％通过如下步骤：

检测所述待处理的细胞的生长密度；

使用胰酶消化并弃去多余的细胞；

用新的所述培养基继续培养。

5.如权利要求1所述的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述检测不到支原体污染的情况之后停止使用所述培养基为通过PCR检测不到支原体的DNA的存在时停止使用所述培养基。

6.如权利要求1所述的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述检测不到支原体污染的情况之后停止使用所述培养基为当所述待处理的细胞处理时长超过两周之后停止使用所述培养基。

7.如权利要求1所述的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述培养基为含20％胎牛血清的DMEM培养基。

8.如权利要求1所述的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述待处理的细胞的获取方法包括如下步骤：

在培养瓶中培养支原体污染的细胞至第二预设密度，舍弃上清液，使用磷酸缓冲溶液洗涤两次；

使用胰蛋白酶溶液进行消化；

用新鲜的基础培养基终止消化，并重悬细胞，得到所述待处理的细胞。

9.如权利要求8中的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述第二预设密度为75％-85％。

10.如权利要求8中的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述消化过程在预设条件下进行，所述预设条件为：温度37℃、CO₂浓度5％。

11.如权利要求8中的支原体污染的处理方法，其特征在于，所述新鲜的基础培养基为含20％胎牛血清的DMEM培养基。