[发明专利]一种低成本纯化六胜肽的方法

权利要求书

1.一种纯化六胜肽的方法，其特征在于，所述方法采用反相聚合物色谱柱通过反相高效液相色谱法纯化六胜肽粗品水溶液，其中先用碱性流动相上样六胜肽粗品水溶液，然后再用含醋酸的酸性流动相梯度洗脱得到醋酸六胜肽溶液；

其中，所述反相聚合物色谱柱的填料为F型SBC MCI GEL反相色谱填料；

其中，所述碱性流动相由碱性流动相A和碱性流动相B组成，所述碱性流动相A为pH值为7.6-8.5的水溶液，所述碱性流动相B为pH值为7.6-8.5的甲醇溶液，所述碱性流动相的流速为10-300ml/分钟，在碱性上样时，碱性流动相A与碱性流动相B的比例为(99-98):(1-2)；

其中，所述含醋酸的酸性流动相由酸性流动相A和酸性流动相B组成，所述酸性流动相A为含0.1-5％(体积百分比)醋酸的水溶液，所述酸性流动相B为含0.1-5％(体积百分比)醋酸的甲醇溶液，用酸性流动相A和酸性流动相B进行梯度洗脱，洗脱梯度选择为在0-(50-150)分钟酸性流动相A与酸性流动相B的比例由(98.5-99.5):(0.5-1.5)到(93-95)：(5-7)，所述酸性流动相的流速为10-300ml/分钟。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述F型SBC MCI GEL反相色谱填料的粒径为30～50μm。

3.如权利要求1所述的方法，其中六胜肽粗品水溶液通过将六胜肽粗品溶解于水溶液，调节pH值至6-9，用滤膜过滤并收集滤液来制备。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述六胜肽粗品与水的质量百分比为1:5-1:30。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述六胜肽粗品与水的质量百分比为1:20。

6.如权利要求3所述的方法，其中将溶解后得到的溶液的pH调节为8.5。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述六胜肽粗品为通过固相合成方法得到的六胜肽粗品。

8.如权利要求1所述的方法，其中，所述碱性流动相的流速为50-150ml/分钟。

9.如权利要求1所述的方法，其中，洗脱梯度为酸性流动相A与酸性流动相B的比例由99:1到95:5，或由99:1到93:7。

10.如权利要求1所述的方法，其中所述酸性流动相的流速为50-150ml/分钟。

11.如权利要求1所述的方法，其中，在0-100分钟酸性流动相A与酸性流动相B的比例由(98.5-99.5):(0.5-1.5)到(93-95)：(5-7)。

12.如权利要求1所述的方法，其中在进行梯度洗脱之后，用含5％醋酸的甲醇溶液恒流洗脱。

13.如权利要求1所述的方法，还包括将所述醋酸六胜肽溶液浓缩并干燥得到纯度大于95％的醋酸型六胜肽的步骤。

14.如权利要求1所述的方法，其中上样和洗脱时的柱温为35-45℃。

15.如权利要求14所述的方法，其中上样和洗脱时的柱温为40℃。