[发明专利]新型长效人生长激素缀合物液体制剂

说明书

本发明涉及长效人生长激素缀合物的液相制剂及其制备方法。

技术领域

本发明涉及长效人生长激素缀合物液体制剂和其制备方法。

背景技术

人生长激素(下文称为“hGH”)是在人垂体腺中产生的由191个氨基酸构成的分子量大约22,000的多肽激素的，，，并且主要用于治疗垂体性侏儒症。常规地，已经使用从人垂体腺提取的hGH，但是由于其有限的供应仅仅非常有限数量的人得到治疗。另外，已经禁止使用从垂体腺提取的hGH，这是由于报道在使用从垂体腺提取的hGH治疗的一些患者中发现了致命的退行性神经障碍——克雅二氏病。最近，遗传工程技术的发展已经使得大肠杆菌和酵母菌中的hGH生产成为可能，并且由其生产的重组hGH制剂自1985年已经在多个国家被批准，并且在经过毒理学和临床测试后已经变为商业上可获得的。

多肽比如hGH具有低稳定性并且因而容易变性，以及被血液中的血清蛋白酶降解并且因而经由肾脏或肝脏容易清除。因此，包含多肽作为药物成分的蛋白质药物必须被频繁地施用至患者以维持其血液浓度和效价。然而，在以注射液的形式给患者施用蛋白质药物的情况下，频繁注射蛋白质药物以维持活性多肽的血液浓度给患者造成极大痛苦。为了解决这样的问题，已经存在许多尝试以增加蛋白质药物在血液中的稳定性和维持其血液浓度处于高水平持续长时段以最大化药物功效。优选的是，这样的蛋白质药物的长效制剂增加蛋白质药物的稳定性，维持高的药物效价，并且不引起免疫反应。

同时，韩国专利号10-0567902和10-0725315公开了通过连接免疫球蛋白Fc区和非肽基聚合物与生理学活性多肽制备的缀合物作为蛋白质药物的长效制剂，其能够最小化蛋白质活性的降低和增加蛋白质稳定性。

可以使用hGH作为生理学活性多肽，使用上面的方法制备长效hGH缀合物。必不可少的是，防止由于在储存和运输过程期间由光、热、或添加剂中的杂质引起的降解引起的物理化学变化比如变性、聚集、吸附、或水解，同时维持hGH的体内活性。由于长效hGH缀合物与hGH多肽相比具有更大的大小和增加的分子量，与hGH多肽相比难以稳定缀合物。

在液体制剂中不稳定，蛋白质这样的稳定性问题已经通过冻干解决。冻干的蛋白质制剂具有维持长期稳定性的优势，但是不便在于必须使用增溶剂重构用于注射并且问题在于在重构或冻干期间产生聚合物引起活性丢失，并且花费大量时间和成本冻干蛋白质。

为了研发稳定的液体hGH制剂，重要的是，通过脱酰胺、聚合物产生和氧化控制hGH的降解模式，比如降解产物产生速率。

虽然液体制剂的温度、pH和添加剂影响降解产物的产生速率，能够稳定临床待应用的所有蛋白质的组合物仍是未知的。稳定特定蛋白质的液体制剂可能不被应用于稳定其它蛋白质。对于最大化液体中蛋白质——具体地hGH——的稳定性，本领域熟知，这必须广泛地事先选择能够最小化蛋白质的特异性分解产物的产生速率的因子或添加剂或其组合。

另外，不同的蛋白质，由于其物理化学差异，在存储期间的不同比率和条件下可能是逐渐失活的。即，由于用于稳定的物质引起的对延长保存期的作用对于不同的蛋白质是不等同的，并且结果，用于提供保存期稳定性的稳定剂取决于目标蛋白质的物理化学性质而具有多种比率、浓度和类型。而且，当组合使用时，稳定剂可能引起由于其间的竞争性相互作用的不利作用和副作用，而非预期的作用。另外，储存的蛋白质的性质和浓度在储存期间可能改变，引起不同的作用。因此，溶液中的蛋白质稳定需要许多努力和防范。