[发明专利]酵母细胞

权利要求书

1.一种Komagataella属酵母细胞，所述细胞包含可通过解阻遏诱导的甲基营养型酵母细胞的直系同源启动子或其变体，其中所述直系同源启动子是甲基营养型酵母细胞的直系同源甲酸脱氢酶(FMD)启动子,其中所述直系同源启动子包含核酸序列SEQ ID No.1及其变体，所述变体包含选自下组的核酸序列：SEQ ID No.35、SEQ ID No.36、SEQ ID No.37、SEQID No.38、SEQ ID No.39、SEQ ID No.40、SEQ ID No.41、SEQ ID No.42、SEQ ID No.43、SEQID No.44、SEQ ID No.45、SEQ ID No.46、SEQ ID No.47、SEQ ID No.48、SEQ ID No.49、SEQID No.50、SEQ ID No.51、SEQ ID No.52、SEQ ID No.53、SEQ ID No.54、SEQ ID No.55和SEQ ID No.56，

其中所述直系同源启动子与编码异源或同源多肽的核酸分子可操作地连接。

2.根据权利要求1所述的酵母细胞，其中所述直系同源启动子是可用甲醇诱导的。

3.根据权利要求1或2所述的酵母细胞，其中所述异源或同源多肽包含信号肽。

4.根据权利要求1或2所述的酵母细胞，其中所述异源或同源多肽包含分泌信号肽。

5.根据权利要求1所述的酵母细胞，其中所述直系同源启动子来源于多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)。

6.根据权利要求1所述的酵母细胞，其中所述直系同源启动子和与所述启动子可操作地连接的编码所述异源或同源多肽的所述核酸分子存在于基因组中。

7.根据权利要求1所述的酵母细胞，其中所述直系同源启动子和与所述启动子可操作地连接的编码所述异源或同源多肽的所述核酸分子作为染色体外核酸构建体存在。

8.根据权利要求1所述的酵母细胞，其中所述变体包含选自下组的核酸序列：SEQ IDNo.35，SEQ ID No.37，SEQ ID No.39，SEQ ID No.40，SEQ ID No.44，SEQ ID No.51，SEQ IDNo.52，SEQ ID No.54，SEQ ID No.55和SEQ ID No.56。

9.根据权利要求1所述的酵母细胞，其中所述变体包含选自下组的核酸序列：SEQ IDNo.35，SEQ ID No.39，SEQ ID No.44，SEQ ID No.51，SEQ ID No.52，SEQ ID No.54，SEQ IDNo.55和SEQ ID No.56。

10.一种用于生产异源多肽的方法，所述方法包括培养权利要求1至9中任意一项所述的酵母细胞的步骤。

11.根据权利要求10所述的方法，其中在所述培养期间，通过解阻遏条件诱导所述异源多肽的表达或增加其表达速率。

12.根据权利要求10所述的方法，其中在解阻遏条件下的所述培养期间，加入甲醇或替代诱导物。