[发明专利]从卵泡抽提物中获得雌性生殖干细胞的方法

说明书

提供一种从卵泡抽提物中获得雌性生殖干细胞的方法。

技术领域

本发明属于不育以及生育力保存领域；更具体地，本发明涉及一种从卵泡抽提物中获得雌性生殖干细胞的方法。

背景技术

流行病学统计发现全球每年约有4,850万对夫妇面临着不孕不育问题(Mascarenhas,M.N.,S.R.Flaxman,T.Boerma,et al.,National,Regional,and GlobalTrends in Infertility Prevalence Since 1990:A Systematic Analysis of277Health Surveys.PLoS Med,2012.9(12):p.e1001356.)，不孕不育已经成为一个主要的健康和社会问题。生殖干细胞可以用于研究不育症的发病机制。发明人在国际上首次发现出生后小鼠卵巢中存在雌性生殖干细胞(FGSC)。使用C端DDX4抗体从出生后小鼠卵巢中磁珠分选生殖细胞，经体外培养后能建立FGSC细胞系。将FGSC移植到不育小鼠卵巢中能够产生有功能的卵母细胞和后代(Zou,K.,Z.Yuan,Z.Yang,et al.,Production of offspringfrom a germline stem cell line derived from neonatal ovaries.Nat Cell Biol,2009.11(5):p.631-636)。随后，White等人使用相同的抗体从育龄妇女卵巢中流式分选出人类FGSC(White,Y.A.R.,D.C.Woods,Y.Takai,et al.,Oocyte formation bymitotically active germ cells purified from ovaries of reproductive-agewomen.Nat Med,2012.18(3):p.413-421)。越来越多的研究发现小鼠、大鼠和人类卵巢中存在FGSC。值得一提的是，最新的临床研究发现将人类FGSC的线粒体注射到患者自身的卵子中能提高卵子质量，增加体外受精(IVF)的成功率(Fakih,M.H.,M.E.Shmoury,J.Szeptycki,et al.,The AUGMENT^SM Treatment:Physician Reported Outcomes of theInitial Global Patient Experience.JFIV Reprod Med Genet 2015.3(3):p.154)。

FGSC具有多种临床应用价值，包括治疗女性不育症，保存女性生育力和推迟女性更年期等。然而，临床上卵巢组织仅能通过三种途径获得：在剖腹产过程中获得；在不孕症检查中通过腹腔镜手术获得以及对各种妇科疾病进行卵巢切除过程中获得。由于卵巢位于腹腔中，获取卵巢组织主要通过开腹手术和腹腔镜手术。制约着FGSC的临床应用。

人类FGSC为推迟女性绝经期、治疗女性不育症以及提供生育力保存方法开辟了新的思路。辅助生殖技术(ART)是一项被广泛应用的医疗技术，ART国际监督委员会报道全球每年至少实施100万例，其目的在于帮助不孕不育的夫妇获得后代。阴道超声引导下卵泡穿刺抽吸术是ART中用于采集卵子的常用技术，卵泡抽提物是在该操作过程中产生的。待挑拣完成熟卵子后它们经常被丢弃，造成了很严重的临床资源浪费。之前的报道发现从卵泡抽提物中能够获得腔前卵泡，经体外培养后能够获得卵子(Wu,J.,L.Z.Zhang and P.Liu,Anew source of human oocytes:preliminary report on the identification andmaturation of human preantral follicles from follicular aspirates.HumanReproduction,1998.13(9):p.2561-2563.)。然而，目前没有文献报道卵泡抽提物中含有能够获得FGSCs的卵巢组织。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从卵泡抽提物中获得雌性生殖干细胞的方法。较佳地，所述的雌性生殖干细胞为人类雌性生殖干细胞。