[发明专利]包含微小RNA识别元件的CMV载体

权利要求书

1.一种巨细胞病毒(CMV)载体，其包含：

(a)编码至少一种异源抗原的第一核酸序列；

(b)第二核酸序列，其包含与CMV基因能操作地连接的第一微小RNA识别元件(MRE)，所述CMV基因对于CMV生长是必需的或增强的，并且其中在由髓系细胞表达的微小RNA存在下所述MRE沉默表达；

(c)编码活性UL128蛋白或其直系同源物的第三核酸序列；和

(d)编码活性UL130蛋白或其直系同源物的第四核酸序列。

2.如权利要求1所述的CMV载体，其中在miR-142-3p、miR-223，miR-27a、miR-652、miR-155、miR146a、miR-132、miR-21或miR-125中的一种或一种以上存在下，所述第一MRE沉默。

3.如权利要求1或2所述的CMV载体，其中所述至少一种异源抗原包含病原体特异性抗原、肿瘤抗原、组织特异性抗原或宿主自身抗原。

4.如权利要求3所述的CMV载体，其中所述宿主自身抗原是源自T细胞受体(TCR)的可变区的抗原或源自B细胞受体的可变区的抗原。

5.如权利要求3所述的CMV载体，其中所述病原体特异性抗原衍生自选自以下的病原体：人类免疫缺陷病毒、猿猴免疫缺陷病毒、单纯疱疹病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、乳头瘤病毒、疟原虫寄生虫和结核分枝杆菌。

6.如权利要求3所述的CMV载体，其中所述肿瘤抗原与选自以下的癌症有关：急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征、急性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴母细胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、恶性黑素瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、结肠癌、肾细胞癌(RCC)和生殖细胞肿瘤。

7.如权利要求1-6中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体不表达活性UL82(pp71)蛋白、US11或其直系同源物。

8.如权利要求1-7中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体不表达活性UL79蛋白或其直系同源物。

9.如权利要求1-8中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体不表达活性US11蛋白或其直系同源物。

10.如权利要求1-6中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体不表达活性UL82(pp71)蛋白或活性UL79蛋白、或其直系同源物。

11.如权利要求1-6中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体不表达活性UL82(pp71)蛋白或活性US11蛋白、或其直系同源物。

12.如权利要求1-6中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体不表达活性UL79蛋白或活性US11蛋白质、或其直系同源物。

13.如权利要求1-6中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体不表达活性UL79蛋白、活性UL82(pp71)蛋白、或活性US11蛋白、或其直系同源物。

14.如权利要求1-13中任一项所述的CMV载体，其中所述CMV载体是人CMV(HCMV)载体或恒河猴CMV(RhCMV)载体。

15.一种在受试者中产生针对至少一种异源抗原的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1-14中任一项所述的CMV载体以在所述受试者中引发针对所述至少一种异源抗原的CD8+T细胞应答。

16.如权利要求15所述的方法，其中由所述CMV载体引发的所述CD8+T细胞中的至少10％受II类MHC或其直系同源物限制。