[发明专利]胃泌酸调节素类似物及其制备和使用方法

说明书

提供了胃泌酸调节素类似物。该肽类似物具有至少两个半胱氨酸。这两个半胱氨酸被六个氨基酸隔开，使得可以采用合适的交联部分将这两个半胱氨酸交联。交联肽具有较长的半衰期和/或功效。例如，将肽类似物组合物用于诱导体重减轻和/或降低血糖水平。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年10月30日提交的美国临时申请第62/248,866号的优先权，通过引用将其内容合并于此。

关于联邦资助研究的声明

本发明是根据由国立卫生研究院授予的合同第GM085092号在政府支持下进行的。政府对本发明享有一定权利。

技术领域

本公开大体上涉及胃泌酸调节素类似物。更具体地，本公开涉及交联的胃泌酸调节素类似物及其用途。

背景技术

肥胖是发展为2型糖尿病(T2DM)的主要危险因素。胃泌酸调节素(OXM)是由胰高血糖素原衍生而来的37-氨基酸肽激素，由于其对葡萄糖体内平衡、食物摄取和能量消耗多方面的影响，该胃泌酸调节素对于治疗T2DM是一种有吸引力的潜在疗法。值得注意的是，发现在将OXM输注至临床前模型中后，其在体重减轻和葡萄糖降低效果方面优于胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体单激动剂的效果。然而，OXM的临床应用因其短暂的循环半衰期而受限制；因此，已经探索了PEG和脂质修饰的OXM类似物。尽管这些缀合物显示出循环半衰期显著更长，但是它们通常表现出效力显著降低；结果是，在其给药期间注射了相对大量的经过修饰的肽。这些大剂量限制了对替代性递送技术(如微针或纳米颗粒)的探索。

发明内容

本公开提供了OXM类似物，其表现出血浆稳定性升高和对GLP-1R和GCGR两者的激活效力更高(参见表1和2)。OXM类似物包括但不限于交联的类似物。

例如，OXM类似物是具有以下序列的交联肽：

HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIA(SEQ ID NO：1)，或其与SEQ ID NO：1具有至少65％同源性的变体。SEQ ID NO：1的第i位的第一氨基酸和第i+7位的第二氨基酸独立地被L-半胱氨酸或D-半胱氨酸替换。位置i可以处于从且包括第7位到第30位之间的任何位置。类似物是在处于i和i+7位的半胱氨酸之间使用交联部分进行交联的。交联部分选自由以下各项组成的组：

取代基R在每次出现时独立地为氢、聚乙二醇(PEG)基团、脂质基团、或脂肪二酸基团，该脂肪二酸基团可以通过间隔基部分(例如，柔性间隔基部分，如PEG间隔基部分)与交联部分隔开。

交联的OXM类似物与野生型OXM相比，具有延长的半衰期和/或表现出优异的抗高血糖活性。

本公开还提供了通过向受试者给予一种或多种本公开的交联OXM类似物来治疗糖尿病(包括2型糖尿病)的方法。本公开还提供了通过向受试者施用一种或多种交联的OXM类似物来降低受试者血糖水平的方法。本公开还提供了通过向受试者施用一种或多种交联的OXM类似物来诱导受试者体重减轻的方法。

附图说明

为了更全面地理解本公开的性质和目的，应结合附图进行以下详细的描述。

图1示出了(a)胃泌酸调节素、胰高血糖素、GLP-1和毒蜥外泌肽-4的序列。下划线标出了对受体激活重要的保守N-末端残基。确定了胃泌酸调节素上半胱氨酸取代和随后交联的位点。(b)结合至GLP-1R胞外域的胃泌酸调节素的结构模型(PDB代码3C59)，交联位点是着色的。胃泌酸调节素结构模仿胰高血糖素的晶体结构(PDB代码：1GCN)，其具有显示为点状II型β-螺旋转角的八肽延伸部分。