[发明专利]具有修饰的J-链的结合分子

说明书

本发明提供包含含有包括拮抗T‑细胞抑制性信号传导途径的结合部分的修饰的J链的IgM，IgA，IgG/IgM或IgG/IgA抗体的结合分子，及其用途。

相关申请的交叉引用

本申请要求2015年9月30日提交的美国临时专利申请系列号62/235,486的申请日优先权，其公开通过引用全文纳入本文。

发明领域

本发明涉及包含含有经修饰以包括影响T-细胞信号传导途径的结合部分的J链的IgM，IgA，IgG/IgM或IgG/IgA抗体的结合分子，及其用途。

背景技术

J链是酸性15-kDa多肽，其通过二硫键与五聚体IgM和二聚体IgA结合，所述二硫键涉及IgM μ或IgA α重链的C-末端处的18个氨基酸分泌尾部片段(tp)中的倒数第二半胱氨酸残基。三个二硫桥分别在Cys 12和100，Cys 71和91，以及Cys 108和133之间形成。参见例如Frutiger等，1992，Biochemistry 31，12643-12647。Sorensen等，2000，Int.Immunol.12(1)：19-27和Yoo等，1999，J.Biol.Chem.274(47)：33771-33777分别报道了将J链纳入人IgM和IgA以及聚合免疫球蛋白装配和与J链缔合的结构要求。Redwan等，2006，HumanAntibodies 15：95-102报道了大肠杆菌中可溶性J链的重组生产。

制备杂合IgA/IgG和IgM/IgG抗体的方法是本领域已知的。因此，Chintalacharuvu等，Clin Immunol 101(1)：21-31中报道了重组产生杂合IgA2/IgG1抗体。据报道，在IgG γ重链末端添加αtp或μtp促进聚合并增强效应功能，如补体活化(Smith等，JImmunol 1995，154：2226-2236)。IgA/IgG杂合抗体同时具有IgA和IgG的特性。用于重组生产IgM抗体的方法在本领域中也是已知的。例如，Tchoudakova A等，人PER.C6细胞中功能性人IgM的高水平表达(High level expression of functional human IgMs in human PER.C6cells).mAbs.2009；1(2)：163-171。

尽管在设计抗体方面取得了进展，但仍需要具有改进的性质(例如改进的亲和性(affinity)，特异性和/或亲合力(avidity))以及与多个结合靶标结合的能力的修饰的抗体。

随着该领域的进展，抗体功能已通过如下方式而被增加：例如，蛋白质工程改造的创新性手段，以提供更高的亲和力、更长的半衰期，和/或更好的组织分布，以及用于增加通过毒性净负荷递送(例如抗体-药物偶联物)的细胞破坏的集中性小分子和大分子技术的组合。另一种提高抗体功能的方法利用了允许一个IgG分子结合两个抗原的免疫球蛋白G(IgG)结构的二价结合。事实上，在某些应用中，通过同时结合两种不同的靶抗原，不对称抗体具有发挥有用功能的良好潜力。为了满足这种需求，已经生产了多种构建体以产生可以结合两种不同抗原的单个分子，从而实现了自然界以前从未出现的功能。这种双特异性方法的一个例子是结合分别在T细胞和B细胞上的CD3和CD19受体的“博纳吐单抗(blinatumomab)”(MT103或AMG103)。将细胞毒性T细胞系连于癌性B细胞允许有效治疗B细胞白血病。