[发明专利]重组乳酸菌及其在口服通用流感疫苗中的用途

说明书

本发明涉及一种口服通用流感疫苗，包括一种重组乳酸菌，该重组乳酸菌表达的蛋白包括但不限于铁蛋白以及在所有已知的流感病毒中表达的高度保守的血凝素（HA）基底部。本发明还涉及一种重组蛋白，包括该高度保守的血凝素基底部和该铁蛋白。

相关申请的交叉引用

本申请要求2015年11月19日提交的美国临时专利申请序列号62/257,242的优先权；该专利申请的公开内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明涉及重组乳酸菌及其在口服通用流感疫苗中的使用。特别的是，本发明涉及一种对于高度保守的血凝素(HA)蛋白(在所有已知的流感病毒中)进行表达的重组乳酸菌及其在通用流感疫苗口服制剂中的使用。

背景技术

全球爆发的流感疫情一直导致相当高的发病率和死亡率。根据美国疾病控制与预防中心(CDC)的数据，季节性流感每年在全世界导致超过200,000人住院，36,000人死亡。另外，在家禽当中的死亡率和相关经济代价是很大的，因为如果在同一个农场以及临近区域有一只家禽被检查感染病毒，那么所有家禽都会被感染致死。目前，预防流感病毒感染的最好方法是通过接种疫苗。鉴于有很多种流感病毒和抗原结构，特别是其头部区域范围总在变化之中，因此季节性流感疫苗的成分必须经常随之更新和改变，从而预防新出现的病毒株。流感疫苗是以流感病毒表层血凝素(HA)的头部区域作为目标，但目前可用的流感疫苗并非通用疫苗。众所周知的是，流感病毒血凝素(HA)的球状头部区域因为突变速率高而具有高变异性。这明显限制了目前所使用针对突变型、变异性流感病毒的流感疫苗疗效。

其头部区域每年具有很高的变异性，这就是为什么需要新型疫苗应对每个流行季节不断变化的病毒株。确定所选的特定类型流感疫苗的相似性可以预防感染流感的相关疾病，因此流感病毒和用以预防的流感疫苗之间的相似性是非常关键的。目前所使用的传统流感疫苗的开发是预测某种用于注射疫苗的病毒，这需要很多个月的时间，以便生产疫苗和及时发出以应对每年不断变异的流感病毒(称为抗原漂移)。每年，世界卫生组织(WHO)预测何种流感病毒的毒株最有可能在下一年流行，允许医药公司开发疫苗以对这些毒株提供最好的免疫性和预防。每季要针对一些流感病毒株重新配制疫苗，但是并不包括当前和下个季节或年份里世界上流行的所有毒株。药品制造商大约需要6个月时间配制和生产数以百万计的剂量以应对季节性流感。偶然情况下，某种新型或被忽视的毒株会在当季流行。如果所开发的流感疫苗不能匹配流行性病毒，这样用于注射的流感疫苗可能没有益处和预防作用。同样可能的是会感染病毒和生病，因为疫苗通常需要大约两周产生效果。如果病毒自身发生变异并能够感染和传播，那么可能会出现全球爆发流感。没有人能够肯定预测何时会爆发流感疫情。由医药公司持续寻找和发明“新型”注射疫苗用以应对每年的流感疫情是有必要的。尽管如此，预测和估计流感疫情的类型是明显不可靠的，因为血凝素结构以及流感类型的不断变异，这一过程是很繁琐的。一次错误的预测可能就会造成巨大的经济损失和生命代价。最为重要的是，对于接种疫苗的错误预测不能为人、家禽以及其它牲畜提供免受流感病毒感染的保护。

目前用于家禽和人的流感接种疫苗是通常以注射形式(液态)通过进入肌肉的灭活抗原。虽然这是接种疫苗的最普遍方式，但这一接种疫苗程序需要专业人员(即护士、医生、受过训练的农民)。一旦注射剂量失误将会明显减小流感接种疫苗的整体效果。同样，用于家禽的传统接种疫苗非常耗费劳力，也非常繁琐。另一方面，液态形式的传统流感疫苗需要冷冻在2-8℃的环境下，这在一些地区明显不方便，比如撒哈拉以南非洲的热带沙漠区以及中国的贫穷地区(那些地方用电紧缺和交通不便是普遍问题)。除此之外，目前的疫苗是病原微生物，这会带来的危险是对载体疫苗产生免疫排斥反应并降低其效用。另外，液态形式包含有防腐剂，有些人认为这些防腐剂会有健康危害，比如在注射疫苗后产生神经错乱。例如，自闭症儿童就是疑似注射了含有防腐剂的液态疫苗。最后但同样重要的是，液态形式的疫苗储存期是相当短的，即通常少于3个月，这明显是一个缺陷。

比较而言，在已知的各种流感病毒株群中，血凝素(HA)的基底部是高度保守的(图6)。因此，它们能够产生广泛中和的抗体，并针对各种流感病毒株群提供相应的保护。