[发明专利]重组乳酸菌及其在口服通用流感疫苗中的用途

权利要求书

1.一种重组乳酸菌细胞，被一种具有改良的荧光蛋白、改良的流感血凝素基底部、铁蛋白和两个连接器的编码序列的表达载体所转化；

其中所述编码序列为SEQ ID NO:1；和其中所述表达载体是pTRKH3。

2.根据权利要求1的重组乳酸菌细胞，其中所述改良的荧光蛋白为橙色荧光蛋白。

3.根据权利要求1的重组乳酸菌细胞，其中所述改良的流感血凝素基底部包括H1HA10基底部和T4噬菌体纤维蛋白折叠子。

4.根据权利要求1的重组乳酸菌细胞，其中所述铁蛋白源自幽门螺杆菌。

5.根据权利要求1-4任一项的重组乳酸菌细胞，其中所述编码序列是SEQ ID NOs：1-6中其中之一。

6.根据权利要求1的重组乳酸菌细胞，其中所述乳酸菌细胞选自包括乳酸杆菌和乳球菌的菌株。

7.根据权利要求1的重组乳酸菌细胞，其中所述表达载体是用于在革兰氏阳性细菌宿主细胞中表达蛋白的表达载体。

8.根据权利要求1或6的重组乳酸菌细胞，其中所述乳酸菌细胞来自干酪乳杆菌。

9.根据权利要求6的重组乳酸菌细胞，其中所述两个连接器包括置于所述改良的荧光蛋白与所述改良的流感血凝素基底部之间的第一个连接器，以及置于所述改良的流感血凝素基底部和所述铁蛋白之间的第二个连接器。

10.根据权利要求9的重组乳酸菌细胞，其中所述第一个连接器包含一个Xa蛋白酶的编码序列、一个KpnI限制位点以及多组氨酸的编码序列。

11.根据权利要求9的重组乳酸菌细胞，其中所述第二个连接器包含TEV蛋白酶的编码序列以及一个AgeI限制位点。

12.根据权利要求9-11任一项的重组乳酸菌细胞，其中所述改良的荧光蛋白和改良的流感血凝素基底部由第一个连接器偶合在一起，所述改良的流感血凝素基底部和所述铁蛋白由第二个连接器偶合在一起。

13.根据权利要求1的重组乳酸菌细胞，其中所述表达载体所表达的重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:7。

14.一种用于在宿主中诱导针对各类流感病毒产生抗体的重组蛋白，其包括氨基酸序列SEQ ID NO:7或由SEQ ID NO:2-6中任一个所编码的。

15.根据权利要求14的重组蛋白，其中所述流感病毒包括H1、H3、H5以及其它H类型。

16.根据权利要求14的重组蛋白，其中所述宿主包括细菌、人和动物细胞。

17.使用根据权利要求1-13中任一项的重组乳酸菌细胞制备一种药物的用途，该药物用于治疗受治主体因各种类型流感病毒所导致的流感。

18.根据权利要求17的用途，其中所述药物是经口服向所述受治主体施用。

19.根据权利要求17或18的用途，其中所述药物是经口服向所述受治主体施用，每周连服三天，连续两周服用。

20.根据权利要求19的用途，其中所述主体是小鼠，所述药物包含1x 10⁹cfu的所述重组乳酸菌细胞。

21.根据权利要求17或18的用途，其中所述药物是针对所述各种类型的流感病毒包括H1、H3、H5其它H型流感病毒的疫苗。