[发明专利]生产高纯度硫酸化HA的改进方法

权利要求书

1.一种用于生产高纯度和硫酸化度为1-3的硫酸化透明质酸(HA)、硫酸化HA-衍生物和/或其混合物的改进方法，其中所述方法包括以下步骤：

a)在用量为相对于HA或HA衍生物的重复二糖单元4.5-5.5摩尔/摩尔当量的有机磺酸存在下，将HA-Na或HA-衍生物-Na溶解在非质子溶剂中；

b)通过加入过量的SO₃-吡啶或SO₃-三甲胺，使步骤a)结束时获得的溶液硫酸化；

c)在乙醇中进行沉淀以获得沉淀物；

d)在过量的NaCl存在下，将获得的沉淀物溶解在水和步骤a)中使用的非质子溶剂的混合物中，所述过量相对于残留的硫酸根基团计算，调节pH在3到4范围内；

e)进一步用乙醇沉淀以获得粉末；

f)洗涤来自步骤e)的粉末，并在真空下干燥获得的产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤f)的洗涤如下：

f')用8:2比例的乙醇/水洗涤沉淀物三次以除去溶剂；

f”)用乙醇/NaOH 0.1M 8:2；乙醇/HCl 8:2；乙醇/水8:2以及最后用无水乙醇连续洗涤以除去吡啶残留物。

3.根据权利要求1或2的方法，其中所述溶解步骤a)在20至30℃的温度下进行20至28小时。

4.根据权利要求1或2的方法，其中所述溶解步骤a)在有机磺酸存在下进行，所述的有机磺酸是甲磺酸。

5.根据权利要求1或2的方法，其中在步骤d)中，将pH调节至3.3-3.5的范围内。

6.根据权利要求1或2的方法，其中步骤a)中使用的HA-Na的透明质酸的起始平均分子量为100,000至250,000Da，或500,000至750,000Da。

7.根据权利要求1或2的方法，其中步骤a)中使用的HA-衍生物-Na的HA-衍生物选自

-HA与脂族、芳族和环状系列的胺的酰胺，酰胺化百分率为0.1-50％；

-HA与脂族、芳族和环状系列的醇的酯，酯化百分率取决于所选择的醇的类型和链长；

-HA的内酯，酯化百分率不超过20％；

未经酰胺化或未经酯化的剩余百分率的HA分别用有机和/或无机碱成盐。

8.根据权利要求1或2任一项所述的方法，其中，在步骤a)中，所述非质子溶剂选自二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮。

9.根据权利要求1或2任一项所述的方法，其中，在步骤a)中，所述非质子溶剂是二甲亚砜。

10.根据权利要求1或2任一项所述的方法，其中，在步骤b)中,通过加入过量的SO₃-吡啶，使步骤a)结束时获得的溶液硫酸化。

11.根据权利要求1或2任一项所述的方法，其中，在步骤c)和步骤e)中，用无水乙醇进行沉淀。

12.根据权利要求3的方法，其中所述溶解步骤a)在25℃下进行24小时。

13.根据权利要求6的方法，其中步骤a)中使用的HA-Na的透明质酸的起始平均分子量为180,000至230,000Da，或700,000至730,000Da。

14.根据权利要求7的方法，其中步骤a)中使用的HA-衍生物-Na的HA-衍生物选自

-HA与脂族、芳族和环状系列的醇的酯，酯化百分率为50-100％；

-HA的内酯，酯化百分率为0.05-10％；

未经酯化的剩余百分率的HA用有机和/或无机碱成盐。

15.根据权利要求1或2的方法，其中步骤a)中使用的HA-衍生物-Na的HA-衍生物选自

-HA与芳脂族、脂环族和杂环系列的胺的酰胺，酰胺化百分率为0.1-50％；

-HA与芳脂族、脂环族和杂环系列的醇的酯，酯化百分率取决于所选择的醇的类型和链长。