[发明专利]新型葡萄糖脱氢酶有效

专利信息
申请号: 201680064644.4 申请日: 2016-10-26
公开(公告)号: CN108350438B 公开(公告)日: 2022-06-24
发明(设计)人: 西尾享一;小嶋裕三;山口庄太郎 申请(专利权)人: 天野酶株式会社
主分类号: C12N9/04 分类号: C12N9/04;C12M1/34;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/09;C12Q1/54;G01N33/66
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 苗堃;金世煜
地址: 日本*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 新型 葡萄糖 脱氢酶
【权利要求书】:

1.一种葡萄糖脱氢酶,其具备以下特征:

(1)作用:对在电子受体存在下将葡萄糖的羟基进行氧化而生成葡糖酸-δ-内酯的反应进行催化;

(2)底物特异性:将对于D-葡萄糖的反应性作为100%时,对于D-木糖的反应性为10%以下;

(3)pH稳定性:pH5~8时稳定;

(4)氨基酸序列:由序列号1所示的氨基酸序列构成。

2.根据权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶,是来自伊竹迦耶曲霉(Aspergillus iizukae)的酶,所述伊竹迦耶曲霉为伊竹迦耶曲霉(Aspergillus iizukae) NBRC 8869菌株,所述葡萄糖脱氢酶具备以下特征:

(1)作用:对在电子受体存在下将葡萄糖的羟基进行氧化而生成葡糖酸-δ-内酯的反应进行催化;

(2)底物特异性:将对于D-葡萄糖的反应性作为100%时,对于D-木糖的反应性为10%以下;

(3)pH稳定性:pH5~8时稳定;

(4)分子量:约60kDa(基于SDS-PAGE)。

3.根据权利要求2所述的葡萄糖脱氢酶,其还具有下述的酶化学性质:

(5)最佳pH:7.0;

(6)最佳温度:50℃;

(7)温度稳定性:在20℃~50℃的范围稳定(pH5.0、1小时)。

4.根据权利要求3所述的葡萄糖脱氢酶,其中,底物特异性是:将对于D-葡萄糖的反应性作为100%时,对于D-木糖的反应性为8%以下。

5.一种葡萄糖脱氢酶基因,其由选自以下(A)、(B)中的任意DNA构成:

(A)对序列号1所示的氨基酸序列进行编码的DNA;

(B)由序列号2所示的碱基序列组成的DNA。

6.一种重组DNA,其包含权利要求5所述的葡萄糖脱氢酶基因。

7.一种微生物,其保有权利要求6所述的重组DNA。

8.一种葡萄糖脱氢酶的制造方法,其包括以下的步骤(ⅰ)和(ⅱ):

(ⅰ)在产生所述基因编码的蛋白质的条件下培养权利要求7所述的微生物的步骤;

(ⅱ)对产生的所述蛋白质进行回收的步骤。

9.一种葡萄糖测定方法,其特征在于,用权利要求1~4中任一项所述的葡萄糖脱氢酶对试样中的葡萄糖进行测定。

10.一种葡萄糖测定用试剂,其包含权利要求1~4中任一项所述的葡萄糖脱氢酶。

11.一种葡萄糖测定用试剂盒,其包含权利要求10所述的葡萄糖测定用试剂。

12.一种葡萄糖传感器,其包含权利要求1~4中任一项所述的葡萄糖脱氢酶。

13.一种酶制剂,其含有权利要求1~4中任一项所述的葡萄糖脱氢酶。

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