[发明专利]免疫原性融合蛋白

说明书

本发明涉及包含融合到第二氨基酸序列的第一氨基酸序列的免疫原性融合蛋白，所述第一氨基酸序列与第一B组链球菌表面蛋白的N‑末端区域的氨基酸序列具有至少80％的序列同一性，所述第二氨基酸序列与第二B组链球菌表面蛋白的N‑末端区域的氨基酸序列具有至少80％的序列同一性。第一和第二B组链球菌表面蛋白的每一种选自由Rib蛋白、Alp1蛋白、Alp2蛋白、Alp3蛋白、Alp4蛋白和AlpC蛋白组成的组。免疫原性融合蛋白还包含至少一种与B组链球菌表面蛋白Alp1、Alp2、Alp3或Alp4的N‑末端区域的氨基酸序列具有至少80％的序列同一性的氨基酸序列。本发明还涉及编码免疫原性融合蛋白的分离的核苷酸序列、载体、宿主细胞、免疫原性产品、疫苗和预防或治疗B组链球菌感染的方法。

发明领域

本发明涉及微生物学以及疫苗技术领域，并且涉及能够赋予对B组链球菌(groupB Streptococcus)感染的免疫的免疫原性融合蛋白的开发。更具体地，本发明涉及一种新颖的免疫原性融合蛋白，所述免疫原性融合蛋白赋予对B组链球菌的侵入性菌株的免疫。本发明还涉及编码免疫原性融合蛋白的分离的核苷酸序列、载体、宿主细胞、疫苗、以及用于预防或治疗B组链球菌感染的方法。

发明背景

在新生儿期，B组链球菌(无乳链球菌(Streptococcus agalactiae))(GBS)是包括脑膜炎的侵入性细菌感染的主要原因。仅在美国，现在每年有约5000个由这种细菌引起的侵入性疾病的病例。这些感染具有约10％的总死亡率，并且很多幸存下来的婴儿具有永久性神经系统后遗症。鉴于此，已经做出了大量的努力来寻找预防和治疗的方法以及来分析GBS藉以引起感染的机制。

GBS也可以引起奶牛中的乳腺炎，其是具有相当大的经济重要性的牛的疾病。针对GBS感染的疫苗的开发也因此在兽医学中是感兴趣的。

约20％的女性是GBS的阴道携带者，并且在由这种细菌引起的新生儿疾病中，来自母体生殖道的垂直传播可能是最常见的感染源。然而，出生时被GBS定植的婴儿中仅约1％受到严重感染的折磨。因此必然是除了出生时暴露于所述细菌以外的其他因素导致新生儿疾病的发展。

B组链球菌的菌株基于多糖荚膜的结构被分成九种血清型(Ia、Ib、以及II-VIII)(Baker,J Inf Dis 1990.161:917)。四种“经典的”血清型Ia、Ib、II、和III在正常菌群中的菌株之中以粗略地相等的比例存在，但是III型是临床上最重要的血清型，特别是因为III型引发了大多数脑膜炎的病例。因为荚膜是已知的毒力因子，已经对其进行了相当详细地研究，特别是在III型菌株中。已经做出努力以开发疫苗，其中III型多糖荚膜将是必要组分。

EP 0 866 133公开了能够保护受体不受B组链球菌引发的感染的疫苗。该发明涉及多糖和ε蛋白片段的组合的使用。该发明还公开了流行病学数据表明类型特异性荚膜在对B组链球菌感染的免疫中起到重要作用(参见第7页第2-3行)。另外，在不同的蛋白与该申请中提到的多糖之间存在许多不同的组合，但是所有的权利要求都包含多糖，其显示该特定组分的重要性。然而，因为与人体组织的交叉反应，使用多糖荚膜作为疫苗可带来问题(Pritchard等人,Infect Immun 1992.60:1598)。如果人们可以开发基于蛋白而不是基于多糖的疫苗，这将因此是非常有价值的。

文献Gravekamp等人,Infection and Immunity,1997年12月,第5216-5221页公开了免疫原性的评估、以及阿尔法(α)C蛋白的重复单元数目和单独的N-末端部分的保护。发现免疫原性随着重复单元数目的增加而降低(参见图2B)。然而，在一个保护测定中还发现，与针对N-末端区域的抗体相比，针对重复单元区域的抗体是保护的主要原因(参见第5219页左列，倒数第6行，以及第5220页右列第26-29行)。

WO 9410317描述了GBS表面蛋白α蛋白在缀合物疫苗的开发中的用途。这种蛋白的缺点是它通常不被III型菌株表达，而III型菌株是许多严重的GBS感染的原因。因此，针对这些菌株的保护性免疫将不被α蛋白疫苗诱发。