[发明专利]通过二硫化物的酶促氢解制备硫醇的方法

权利要求书

1.用于制备式R-SH的硫醇的方法，其至少包括以下步骤：

a)制备混合物，其包含：

1)式R-S-S-R'的二硫化物，其中R和R'是相同或不同的，彼此独立地表示包含1至20个碳原子的线性，支化或环状的烃基团，所述链是饱和的或带有一个或多个呈双键或三键形式的不饱和，R和R'也可以一起并且与携带它们的硫原子一起形成包含4至22个原子的环状分子，

2)催化量的带有巯基的氨基酸或含巯基的肽，

3)催化量的酶，其催化在两当量的所述带有巯基的氨基酸或所述含巯基的肽之间产生的二硫键的还原反应，

4)催化量的酶，其催化在步骤b)中使用的有机还原化合物的脱氢反应，

5)催化量的所述两种催化该还原反应和脱氢反应的酶的共同的辅因子，

b)相对于式R-S-S-R'的二硫化物以化学计量的量加入有机还原化合物，

c)进行酶促反应，

d)回收式R-SH的硫醇和式R'-SH的硫醇，

e)任选地分离和任选地纯化式R-SH的硫醇和式R'-SH的硫醇。

2.根据权利要求1所述的方法，其至少包括以下步骤：

a')制备混合物，其包含：

·式R-S-S-R'的二硫化物，

·催化量的带有巯基的氨基酸或含巯基的肽，

·催化量的对应于所述带有巯基的氨基酸或所述含巯基的肽的还原酶，

·催化量的NADPH，

b')与催化量的对应脱氢酶一起加入相对于二硫化物为化学计量的量的有机还原化合物，

c')进行酶促反应，

d')回收式R-SH的硫醇和式R'-SH的硫醇，

e')任选地分离和任选纯化式R-SH的硫醇和式R'-SH的硫醇。

3.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中基团R和R'，是相同或不同的，彼此独立地选自线性或支化，饱和或不饱和的烃基，环烃基，芳基，烃芳基或芳烃基，其包含1至20个碳原子，并且任选通过一个或多个选自醇，醛，酮，酸，酰胺，腈或酯官能团或带有硫，磷，硅或卤素的官能团进行官能化。

4.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中式R-S-S-R'的二硫化物是二甲基二硫醚。

5.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中带有巯基的氨基酸或含巯基的肽选自半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽和硫氧还蛋白。

6.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中有机还原化合物是带有羟基官能团的供氢有机还原化合物，其选自醇，糖。

7.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述有机还原化合物选自葡萄糖，葡萄糖6-磷酸酯和异丙醇。

8.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述反应的pH为6-8。

9.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中在整个反应期间，所述有机还原化合物/二硫化物摩尔比为0.01-100。

10.根据权利要求9所述的方法，其中在整个反应期间，所述有机还原化合物/二硫化物摩尔比为0.5-5。

11.根据权利要求9所述的方法，其中在整个反应期间，所述有机还原化合物/二硫化物摩尔比等于1。

12.一种混合物的用途，用于从二硫化物和有机还原化合物合成硫醇，该混合物包含：

·式R-S-S-R'的二硫化物，

·催化量的带有巯基的氨基酸或含巯基的肽，

·催化量的酶，其催化在两当量的所述带有巯基的氨基酸或所述含巯基的肽之间产生的二硫键的还原反应，

·催化量的催化有机还原化合物的脱氢反应的酶，

·催化量的所述两种催化该还原反应和脱氢反应的酶的共同的辅因子，和

·有机还原化合物；

其中R和R'如在权利要求1中所定义。