[发明专利]基因治疗以预防对过敏原的反应

说明书

本发明涉及一种载体，其包含可操作地连接到编码阻断过敏反应的治疗基因的核酸序列的启动子。本发明还涉及包含该载体的组合物以及使用该载体以减少或抑制哺乳动物中对过敏原的免疫应答或过敏反应的方法。

相关申请的交叉引用

本专利申请要求于2016年3月29日提交的美国临时专利申请号62/314,740和于2015年4月9日提交的美国临时专利申请号62/145,035的权益，其通过引用并入本文。

以电子方式提交材料的引用并入

本文通过引用将其全部内容并入的是与本文同时提交并且如下标识的计算机可读核苷酸/氨基酸序列表：于2016年3月29日创建的名为“722135_ST25.TXT”的一个5,718字节ASCII(文本)文件。

发明背景

过敏原在易感个体中引起各种反应，从皮疹到致命的过敏反应。这些反应由与过敏原抗原特异性免疫球蛋白E(IgE)连接的I型超敏反应介导。已经有相当大的兴趣，用中断过敏原特异性IgE诱发过敏反应的疗法来治疗过敏性个体。一种这样的方法是用重组DNA衍生的人源化IgG1_κ单克隆抗体奥马珠单抗(其结合人IgE)来治疗。奥马珠单抗抑制IgE与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面上的IgE受体的结合，从而限制了过敏反应介质的释放程度。

使用抗IgE单克隆抗体作为在敏感性个体中针对过敏原诱导的过敏反应的预防性治疗的挑战在于：单次给予奥马珠单抗所提供的保护估计为2至4周。当前治疗的较短半衰期需要至少每月肠胃外给药奥马珠单抗以维持持久的有效治疗。

因此，需要开发替代的组合物和方法来施用IgE特异性抗体并预防性治疗过敏原诱导的过敏反应。本发明提供了此类组合物和方法。根据本文提供的详细描述，本发明的这个优点和其它优点将变得明显。

发明概述

本发明提供了一种载体，其包含可操作地连接到核酸序列的启动子，所述核酸序列编码抗IgE抗体或其抗原结合片段，或编码可溶性IgE受体、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、IL-13或IL-4。本发明还提供了包含所述载体的组合物，以及使用所述载体来抑制或减少哺乳动物中对过敏原的免疫应答或过敏反应的方法。此外，本发明提供了一种提供重组人源化小鼠过敏模型的方法。

附图简述

图1A是用于开发重组人源化小鼠过敏模型的实验方案的示意图。

图1B-1D是描述实验数据的图，其说明了通过ELISA测量的用来自花生过敏性或对照供体的人血单核细胞重建的NOD-scid-IL2Rγ^null(NSG)小鼠中总人IgG(图1B)、总人IgE(图1C)和花生特异性IgE(图1D)的水平(平均值±SEM，n＝4/组)。

图1E提供了花生提取物攻击后小鼠的图像。左栏-用来自非过敏性供体的单核细胞重建的小鼠，其在花生攻击后表现正常。右栏-用来自花生过敏性供体的单核细胞重建的小鼠，其在花生攻击后1分钟显示出眼/口鼻周围的浮肿、毛发直立和皮毛瘙痒/皱褶。

图1F-1G说明在第5周发生攻击后30分钟，在花生过敏性(n＝3)和对照小鼠(n＝3)中的过敏反应评分(1至5)(图1F)或血浆组胺水平(图1G)的实验数据图。

图1H是说明小鼠皮肤中被动皮肤过敏反应的图像，其中反应产生图中所示的可见蓝色。在皮内注射50μl来自NSG小鼠的混合血清之前1天对初次实验的(naive)Balb/C小鼠的腹部剃毛，所述NSG小鼠用来自花生过敏性个体或来自对照供体(致敏并在第7.5周时用花生提取物攻击)的血液单核细胞重建。皮内注射该血清24小时后，向小鼠静脉注射100μl0.5％Evan蓝染料和100μg花生提取物的混合物。30分钟后，将小鼠处死，将腹部皮肤翻转，并通过可见的蓝色检查反应。