[发明专利]由组分III制造并纯化出用于静脉注射的凝血酶原复合物浓缩剂的方法以及治疗和预防具有抑制剂的A型血友病或感染了HIV‑1和HIV‑2的B型血友病患者的方法

权利要求书

1.一种由血浆组分III制造并纯化出凝血酶原复合物浓缩剂(PCC)的静脉注射剂的方法，包括以下步骤：

a)在缓冲液中将组分III糊剂复原以产生组分III悬浮液；

b)调节该组分III悬浮液的pH和温度；

c)进行该组分III悬浮液的PEG沉淀；

d)将该组分III悬浮液离心并收集上清液；

e)用10CP+90SP过滤器过滤该上清液；

f)对该上清液进行溶剂去污剂病毒灭活；

g)进行该上清液的弱阴离子交换层析；

h)两次冲洗该上清液并洗脱两到三次；

i)用10K膜超滤该上清液；

j)调节该上清液的pH；

k)调节该上清液的人因子IX的活性；

l)对该上清液进行无菌过滤和纳米过滤以去除病毒；和

m)填装并冻干该上清液以获得PCC的静脉注射剂。

2.权利要求1的方法，其中组分III是通过血浆的科恩乙醇分馏获得的，并且包含新发现的蛋白质KH 11、KH 12、KH 13、KH 14、KH 15、KH 16、KH 17和KH 18。

3.权利要求1的方法，其中将该组分III悬浮液重悬于含有至多10％肝素和至多80mM柠檬酸钠的缓冲液中，并调节pH和温度。

4.权利要求1的方法，其中用PEG将该组分III悬浮液以4.0～10.0重量％的终浓度沉淀。

5.权利要求1的方法，其中该溶剂去污剂病毒灭活包括在25℃下用6小时添加TNBP至0.3％的终浓度和吐温-80至1.0％的终浓度。

6.权利要求1的方法，其中该弱阴离子交换层析为终浓度为4～10重量％的DEAE A-50。

7.权利要求1的方法，其中冲洗该上清液包括使用包含至多1.0M柠檬酸钠和至多2.0M NaCl的冲洗缓冲液进行两次。

8.权利要求1的方法，其中冲洗该上清液包括使用包含至多2.0M柠檬酸钠和至多2.0M NaCl的冲洗缓冲液进行两到三次。

9.权利要求1的方法，其中该无菌过滤以0.22μm进行。

10.权利要求1的方法，其中该纳米过滤以20nm进行。

11.一种治疗患者的方法，包括用由权利要求1的方法获得的PCC的静脉注射剂对有此需要的患者进行给药，

其中该PCC的静脉注射剂将受损的和有病的细胞转化或修复成健康的细胞，

其中该PCC的静脉注射剂保护细胞改变，

其中该PCC的静脉注射剂向患者身体发送信号以产生健康的新细胞，从而防止新细胞受细胞内和细胞外损伤信号的影响。

12.一种阻止HIV-1和HIV-2在患者体内复制的方法，包括用由权利要求1的方法获得的PCC的静脉注射剂对有此需要的患者进行给药。

13.权利要求12的方法，其中有此需要的患者是B型血友病患者。

14.一种杀死患者体内的HIV-1和HIV-2的方法，包括用由权利要求1的方法获得的PCC的静脉注射剂对有此需要的患者进行给药。

15.权利要求14的方法，其中有此需要的患者是B型血友病患者。

16.一种预防患者体内感染HIV-1和HIV-2的方法，包括用由权利要求1的方法获得的PCC的静脉注射剂对有此需要的患者进行给药。

17.权利要求16的方法，其中有此需要的患者是B型血友病患者。

18.根据权利要求1的方法生产的PCC的静脉注射剂。

19.一种在患者体内治疗和预防具有抑制剂的A型血友病的方法，包括用权利要求18的PCC的静脉注射剂对有此需要的患者进行给药。