[发明专利]由组分VI制造AFOD静脉注射剂的方法

说明书

本主题涉及一种制造AFOD静脉注射剂的方法，包括将组分IV1+IV4糊剂与WFI一起溶解；加入乙酸钠，调节pH值，搅拌直至完全溶解；冷却；进行压滤；收集包含新发现的蛋白质KH 24、KH 25、KH 26和KH 27的AFOD糊剂；用缓冲液溶解糊剂；离心；用深度过滤器过滤；加入吐温‑80；冷却；调节pH值并在冷却的同时加入冷的醇；离心以获得第二AFOD糊剂；用缓冲液溶解第二糊剂并调节pH值；用深度过滤器过滤；超滤；接受WFI透析；纳米过滤去除病毒；浓缩并调节pH值；添加稳定剂；填装并进行无菌过滤，以得到AFOD静脉注射剂。本发明涉及液体或冻干形式的AFOD静脉注射剂，用于预防和杀死HIV‑1和HIV‑2。

技术领域

本专利申请要求于2015年4月2日提交的美国临时专利申请No.62/142,197的优先权，其由本发明人提交，并且通过引用将其整体并入本文。

本主题涉及一种AFOD静脉注射剂，其从组分IV获得并且具有新发现的蛋白质KH24、KH 25、KH 26和KH 27。具体而言，本主题涉及治疗健康状况，特别是病毒HIV-1和HIV-2。

背景技术

组分IV(Fr.IV)是血浆衍生产物工业中的废弃部分。其主要含有人血白蛋白、载脂蛋白、转铁蛋白、α1抗胰蛋白酶结合珠蛋白、波形蛋白和新发现的蛋白质。

人类免疫缺陷病毒(HIV)攻击免疫系统，后者是人体对疾病的天然防御。如果一个人感染了HIV，就很难抵抗感染和疾病。HIV-1和HIV-2是两种不同的病毒株，其中HIV-1在世界范围内占主导地位，而HIV-2则集中在西非。

发明内容

AFOD是来自人血浆的组分IV的新型血浆衍生产物。AFOD含有15种人蛋白质，其中4种是新发现的蛋白质KH 24、KH 25、KH 26和KH 27。根据本主题，AFOD可以从组分IV糊剂回收得到，其包括15种现有的和新近发现的静脉注射抗HIV的蛋白质。在这些蛋白质中，11种是现有的蛋白质，4种是新发现的蛋白质KH 24、KH 25、KH 26和KH 27。

本主题的最终产物不仅阻止HTV-1和HIV-2的复制，而且还杀死HIV-1和HIV-2。因此，可以从世界上根除并预防HIV-1和HIV-2感染。

本主题的一个实施方案涉及一种制造AFOD静脉注射剂的方法，包括以下步骤：

a)以1:9的稀释比用冷的注射用水(WFI)将组分IV1+IV4糊剂溶解以产生悬浮液；

b)向该悬浮液中加入乙酸钠以达到20mM的浓度，将该悬浮液的pH值调节至约3～8，并搅拌直至完全溶解；

c)将该悬浮液冷却至0～20℃的温度；

d)用过滤器进行压滤；

e)收集包含新发现的蛋白质KH 24、KH 25、KH 26和KH 27的第一AFOD糊剂；

f)在pH 3～8的条件下以1:9的稀释比用TRIS-HCL缓冲液将该第一AFOD糊剂溶解；

g)在10℃的温度下离心该第一AFOD糊剂以获得上清液；

h)用深度过滤器过滤该上清液以获得第一澄清滤液；

i)在该第一澄清滤液中添加吐温-80至1重量％的浓度，以及TNBP至0.3重量％的浓度，同时将溶液在25℃的温度下保持6小时；

j)将该溶液冷却至1℃的温度；

k)调节pH至约3～8，加入冷的醇至10～40重量％的浓度，同时冷却直至温度为-5℃；

l)离心以获得第二AFOD糊剂；