[发明专利]乙酰乳酸脱羧酶

权利要求书

1.ALDC酶组合物在啤酒和/或葡萄酒和/或苹果酒和/或梨酒和/或清酒发酵中的用途，其中所述组合物包含乙酰乳酸脱羧酶ALDC酶和锌，其中所述ALDC酶来自短芽孢杆菌(Bacillus brevis)，其中所述ALDC酶组合物通过包括以下步骤的方法制备：

在培养介质中培养宿主细胞，其中所述培养介质以25μM至100μM补充Zn²⁺，其中所述宿主细胞将ALDC酶分泌到所述培养介质中；

其中所述组合物中的ALDC酶相比无外加Zn²⁺制备的ALDC酶具有增加的活性和/或稳定性。

2.如权利要求1中所述的用途，其中所述锌以60μM至100μM的浓度补充。

3.权利要求1或2所述的用途，其中所述宿主细胞是芽孢杆菌属宿主细胞。

4.权利要求3所述的用途，其中所述芽孢杆菌属宿主细胞是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

5.如权利要求1或2所述的用途，其中所述ALDC酶是用戊二醛处理过的ALDC酶。

6.如权利要求5所述的用途，其中以对应于0.1g至5g戊二醛/g纯ALDC酶的浓度用戊二醛处理所述ALDC酶。

7.如权利要求1或2所述的用途，其中所述ALDC酶的活性在950至2500单位/mg蛋白质的范围内。

8.如权利要求1或2所述的用途，其中所述ALDC酶的活性在1000至2500单位/mg蛋白质的范围内。

9.如权利要求1或2所述的用途，其进一步包含选自由以下各项组成的组中的至少一种另外的酶或酶衍生物：乙酰乳酸还原异构酶、乙酰乳酸异构酶、淀粉酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、纤维素酶、葡聚糖酶、支链淀粉酶、异淀粉酶、内切葡聚糖酶和相关β-葡聚糖水解辅助酶、木聚糖酶、木聚糖酶辅助酶和蛋白酶。

10.如权利要求9所述的用途，其中所述木聚糖酶辅助酶选自阿拉伯呋喃糖苷酶、阿魏酸酯酶和木聚糖乙酰酯酶。

11.如权利要求1或2所述的用途，其中所述ALDC酶具有与选自SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3和SEQ ID NO:5中的任一者具有至少80％同一性的氨基酸序列。

12.一种用于增加ALDC酶在包含产ALDC酶的宿主细胞的发酵介质和/或成熟介质中的活性和/或稳定性的方法，其中所述方法包括以下的步骤：在培养介质中培养所述产ALDC酶的宿主细胞，其中所述培养介质以25μM至100μM补充Zn²⁺，其中所述宿主细胞将ALDC酶分泌到所述培养介质中；

其中所述培养介质中的ALDC酶相比无外加Zn²⁺制备的ALDC酶具有增加的活性和/或稳定性,其中所述ALDC酶来自短芽孢杆菌(Bacillus brevis)。

13.如权利要求12所述的方法，其中以60μM至100μM的浓度补充所述锌。

14.如权利要求12或13所述的方法，其中所述宿主细胞为芽孢杆菌属(Bacillus)宿主细胞。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述芽孢杆菌属宿主细胞是枯草芽孢杆菌。