[发明专利]产生重组蛋白的方法在审

专利信息
申请号: 201680028259.4 申请日: 2016-05-13
公开(公告)号: CN107580630A 公开(公告)日: 2018-01-12
发明(设计)人: G.B.芬卡;M.霍尔;M.尤登;I.沃尔加里斯 申请(专利权)人: 葛兰素集团有限公司
主分类号: C12P21/02 分类号: C12P21/02;C07K16/00;C07K1/14;C12N1/38
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司72001 代理人: 李唐,周齐宏
地址: 英国梅*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 产生 重组 蛋白 方法
【权利要求书】:

1.在宿主细胞中产生重组蛋白的方法,其包括在细胞培养期间添加PEI。

2.释放由宿主细胞培养物表达的重组蛋白的方法,其包括在细胞培养期间添加PEI。

3.降低表达重组蛋白的细胞培养物的粘度的方法,其包括在细胞培养期间添加PEI。

4.提高由细胞培养物表达的重组蛋白的细胞外浓度的方法,其包括在细胞培养期间添加PEI。

5.减少收获表达重组蛋白的细胞培养物的时间长度的方法,其包括在细胞培养期间添加PEI。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述重组蛋白回收自细胞外培养基。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述宿主细胞或细胞培养物为具有周质的革兰氏阴性细菌。

8.根据权利要求7所述的方法,其中所述革兰氏阴性细菌为大肠杆菌。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在收获之前添加PEI。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在诱导时或诱导所述重组蛋白表达之后添加PEI。

11.根据权利要求9或10所述的方法,其中在从诱导所述重组蛋白的表达至收获前约30分钟的任何时间点添加PEI。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在细胞培养期间持续添加PEI。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PEI是支链的。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述PEI的分子量为50-1000 kDa。

15.根据权利要求14所述的方法,其中所述PEI的分子量为约750 kDa。

16.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述重组蛋白(i)是抗原结合蛋白;和/或(ii)具有25 kDa或更低的分子量(MW)。

17.药物组合物,其包含如使用权利要求1至16中任一项所述的方法获得的重组蛋白。

18.PEI作为表达重组蛋白的宿主细胞培养物的细胞培养增强剂的用途。

19.PEI作为细胞培养期间的释放剂以提高由所述细胞表达的细胞外重组蛋白滴度的用途。

20.根据权利要求18或19的用途,其中所述宿主细胞或细胞培养物是大肠杆菌和/或所述重组蛋白从细胞外培养基回收。

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