[发明专利]粪便微生物群样品的制备方法有效
申请号: | 201680023630.8 | 申请日: | 2016-04-22 |
公开(公告)号: | CN107530280B | 公开(公告)日: | 2021-10-26 |
发明(设计)人: | H·阿法加得;C·史怀特纳;C·朱斯特;J·多尔;P·勒佩吉;C·马莱特;S·拉博特;F·方瑟卡;H·布罗迪尔 | 申请(专利权)人: | 玛阿特制药公司;法国国家农业;食品与环境研究院 |
主分类号: | A61K9/107 | 分类号: | A61K9/107;A61K9/19;A61K35/741;A61K35/74;A61K47/26;A61K47/10;A61P1/00 |
代理公司: | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人: | 傅宇昌 |
地址: | 法国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 粪便 微生物 样品 制备 方法 | ||
1.用于制备来自供者受试者的粪便微生物群样品的方法,该方法包括下列步骤:
a)提取至少一个来自供者受试者的粪便微生物群样品,
b)在取样后少于5分钟的时限内,将在a)中获得的所述样品放置在不透氧气的收集装置中,
c)将在b)中获得的样品与至少一种包含至少一种冷冻保护剂和至少一种填充剂的盐水水溶液相混合,
d)任选地,将在c)中获得的混合物进行过滤,和
e)通过在-15℃至-100℃的温度下进行冷冻来储存在c)或d)中获得的混合物,
其中步骤b)至e)在厌氧生活下进行;
所述至少一种填充剂为麦芽糖糊精;并且
所述至少一种冷冻保护剂选自海藻糖、半乳糖-乳糖及其混合物。
2.根据权利要求1的方法,其特征在于,在步骤d)中,将在c)中获得的混合物通过包含具有小于或等于0.7mm的直径的孔的过滤器进行过滤。
3.根据权利要求1的方法,其特征在于,在步骤d)中,将在c)中获得的混合物通过包含具有小于或等于0.5mm的直径的孔的过滤器进行过滤。
4.根据权利要求1的方法,其特征在于,在步骤e)中通过在-60℃至-90℃的温度下进行冷冻来储存在c)或d)中获得的混合物。
5.根据权利要求1的方法,其特征在于,被放置在步骤b)的收集装置中的样品在步骤c)之前经历运输步骤。
6.根据权利要求1的方法,其特征在于,在步骤b)和c)之间,将被放置在步骤b)的收集装置中的样品在33℃至40℃的温度下温育75小时的最长持续时间。
7.根据权利要求1至6之一的方法,其特征在于,在所述盐水水溶液中存在的冷冻保护剂的总量为相对于溶液总体积而言3至30重量%。
8.根据权利要求1至6之一的方法,其特征在于,在所述盐水水溶液中存在的冷冻保护剂的总量为相对于溶液总体积而言4重量%至20重量%。
9.根据权利要求1至6之一的方法,其特征在于,所述盐水水溶液包含:
-至少一种盐,其选自氯化钠、氯化钙、氯化镁、氯化钾、葡糖酸钠和乙酸钠,和
-任选地,至少一种抗氧化剂。
10.根据权利要求9的方法,其特征在于,所述至少一种抗氧化剂选自L-抗坏血酸钠、生育酚、L-半胱氨酸盐酸盐一水合物及其混合物。
11.根据权利要求1至6之一的方法,其特征在于,所述填充剂为麦芽糖糊精的混合物,其中麦芽糖糊精的量为相对于溶液总体积而言4至20重量%。
12.根据权利要求1至6之一的方法,其特征在于,它包括在厌氧生活下使在e)中获得的经冷冻的样品解冻直至环境温度的步骤f)。
13.通过根据权利要求12的方法来获得的来自供者受试者的粪便微生物群样品,其用于在自体或同种异体粪便微生物群移植中使用。
14.通过根据权利要求12的方法来获得的来自供者受试者的粪便微生物群样品,其用于为了治疗肠道生态失调来进行使用。
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