[发明专利]用于快速活微生物列举的光谱强度比(SIR)分析有效

专利信息
申请号: 201680009125.8 申请日: 2016-01-09
公开(公告)号: CN107250374B 公开(公告)日: 2021-09-24
发明(设计)人: E·扎哈维 申请(专利权)人: 塔康特精确有限公司
主分类号: C12Q1/04 分类号: C12Q1/04
代理公司: 北京律盟知识产权代理有限责任公司 11287 代理人: 路勇
地址: 以色列*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 用于 快速 微生物 列举 光谱 强度 sir 分析
【权利要求书】:

1.一种区别经处理样品中的活细菌与灭活细菌的方法,其包括:

用单一膜缔合染料对所述样品进行染色,其中所述单一膜缔合染料对活细菌和灭活细菌染色;

用λ激发下的入射光照射所述样品,其中,当被所述单一膜缔合染料染色时,被照射的经染色的活细菌显示第一最大发射峰,且其中被照射的经染色的灭活细菌显示第二最大发射峰,所述第二最大发射峰与所述第一最大发射峰相比移位;

测量每一细菌细胞的(i)波长λ1下来自所述单一膜缔合染料的发射光的强度I1;和(ii)波长λ2下来自所述单一膜缔合染料的发射光的强度I2;

计算比率I2/I1;以及

基于所述计算的I2/I1比率是大于还是小于预定阈值,确定所述细菌细胞是活的还是灭活的,其中所述方法不以疾病的诊断为目的。

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述膜缔合染料是N-(3-三乙基铵丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶鎓二溴化物(FM1-43)。

3.根据权利要求1所述的方法,其中所述膜缔合染料是N-(3-三乙基铵丙基)-4-(6-(4-(二乙基氨基)苯基)己三烯基)吡啶鎓二溴化物(FM 4-64)。

4.根据权利要求1所述的方法,其中λ激发介于488 nm与570 nm之间。

5.根据权利要求4所述的方法,其中λ激发为488 nm。

6.根据权利要求2所述的方法,λ1为530 nm且λ2为610 nm。

7.根据权利要求3所述的方法,λ1为670 nm且λ2为780 nm。

8.根据权利要求1所述的方法,其进一步包括基于所述计算的I2/I1比率是大于还是小于预定阈值确定所述细菌细胞是活的还是灭活的包括比较I2/I1与阈值A。

9.根据权利要求8所述的方法,其中所述阈值A为2.0,活细菌具有 2.0的I2/I1,且灭活细菌具有 2.0的I2 /I1。

10.根据权利要求1所述的方法,其中基于所述计算的I2/I1比率是大于还是小于预定阈值,确定所述细菌细胞是活的还是灭活的步骤包括:

通过用所述样品的所述I2/I1除以仅含活细菌的对照的I2/I1比率来计算无活力参数;以及

基于所述计算的无活力参数是大于还是小于阈值B,确定所述细菌细胞是活的还是灭活的。

11.根据权利要求10所述的方法,其中所述阈值B为1.0,活细菌具有≤ 1.0的无活力参数,且灭活细菌具有 1.0的无活力参数。

12.一种区别经处理样品中的活细菌与灭活细菌的方法,其包括:

用FM1-43染料对所述样品进行染色;

用488 nm的λ激发下的入射光照射所述样品,其中被照射的经所述FM1-43染料染色的活细菌显示第一最大发射峰,且其中被照射的经所述FM1-43染料染色的灭活细菌显示第二最大发射峰,所述第二最大发射峰与所述第一最大发射峰相比移位;

测量每一细菌细胞的(i)波长λ1 530 nm下的发射光的强度I1和(ii)波长λ2 610 nm下的发射光的强度I2;

计算比率I2/I1;以及

当I2/I1 2.0时确定细菌细胞是活的,且当I2/I1 2.0时确定所述细菌细胞是灭活的,其中所述方法不以疾病的诊断为目的。

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