[发明专利]青皮药材指纹图谱检测方法及其指纹图谱

说明书

本发明公开了一种青皮药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，涉及中药材的指纹图谱技术领域。方法包括：(a)对照品溶液的制备；(b)供试品溶液的制备；(c)HPLC检测条件；(d)以橙皮苷为参照峰的标准指纹图谱的制定；(e)指纹图谱的质量控制。该方法对各供试品的前处理方法简单，特征性成分保留完整，重复性、稳定性良好，精密度高，具一定的专属性；所得指纹图谱中各特征峰分离效果较好；可用于鉴别青皮药材的真伪及优劣。

技术领域

本发明涉及中药材的指纹图谱技术领域，尤其是青皮药材的指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。

背景技术

中药材指纹图谱是指中药材经过适当处理后，采用一定的分析手段和检测仪器得到的，能够标示该中药材特性的图谱，它是现阶段可以较全面地反映中药材内在质量的最有效的手段之一，也得到了国际社会的认可。

青皮为常用中药，主要为芸香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培变种的干燥幼果或未成熟果实的青色果皮。青皮主要分为四花青皮和个青皮。每年5～6月收集自落的幼果，晒干，习称“个青皮”；7～8月采收未成熟的果实，在果皮上纵剖成四瓣至基部，除尽果瓤，晒干，习称“四花青皮”；对切成两半者，称“对开青皮”。青皮味苦、辛，性温，具有疏肝破气、消积化滞、散结的功效，主治胸胁脘腹胀痛、食积不消、疝气、乳痈等。青皮与枳实、枳壳等均来源于芸香科橘属的植物果实或果皮(枳实为芸香科植物酸橙Citrusaurantium L.及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis Osbeck的干燥幼果，枳壳芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实)，其不仅在外表体征上容易混淆，主要指标性成分也均为橙皮苷、柚皮苷、辛弗林等成分；但是在中医治疗应用上又有较大区别，不能混用，因此，制定青皮的指纹图谱非常必要。

目前对于青皮的指纹图谱已有的研究中，有以气相色谱对挥发油成分建立指纹图谱，也不乏利用液相技术对其进行质量控制，但是色谱图中共有峰过少，不能建立青皮的特征指纹图谱，易与枳实、枳壳等药材混用。

发明内容

本发明所要解决的问题是提供一种青皮药材指纹图谱的检测方法及其指纹图谱，利用该图谱可监控青皮药材的质量及鉴别真伪。

为了解决上述技术问题，本发明技术方案为：

青皮药材指纹图谱的检测方法，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

称取橙皮苷对照品，置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

称取青皮药材粉末(过四号筛)，置锥形瓶中，加甲醇，称重，超声提取20～45min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得青皮药材供试品溶液；

(3)HPLC检测：

吸取上述步骤(2)所得供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录90min内的指纹图谱。

色谱条件为：色谱柱为C₁₈反相色谱柱(4.6×250mm,5μm)；柱温为30～40℃；检测波长为360nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1～0.5％磷酸溶液，总流速为0.8～1.2ml/min；

采用下述梯度洗脱方式洗脱：

表1梯度洗脱程序表

本发明所建立的本青皮药材的指纹图谱，由17个共有指纹峰构成，所述指纹图谱的17个共有指纹峰的相对保留时间范围及相对标准偏差如下见表2

表2指纹图谱17个共有指纹峰的相对保留时间及相对标准偏差