[发明专利]青皮药材指纹图谱检测方法及其指纹图谱

权利要求书

1.青皮药材的指纹图谱检测方法，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

称取橙皮苷对照品，置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

称取青皮药材粉末过四号筛，置锥形瓶中，加甲醇，称重，超声提取20～45min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得青皮药材供试品溶液；

(3)HPLC检测：

色谱条件为：色谱柱为C₁₈反相色谱柱4.6×250mm,5μm；柱温为30～40℃；检测波长为360nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸溶液，总流速为0.8～1.2ml/min；分析时间90分钟；采用梯度洗脱，梯度洗脱程序见表1：

表1 梯度洗脱程序表

(4)以橙皮苷为参照峰的标准指纹图谱的制定

吸取步骤(1)(2)所得的橙皮苷对照品溶液20μl、青皮药材供试品溶液10μl，分别注入高效液相色谱仪中，照高效液相色谱法测定，记录色谱图；依据所得的13批青皮药材的指纹图谱，制定标准指纹图谱；所述标准指纹图谱具有17个特征峰，其中9号峰为橙皮苷；

(5)指纹图谱的质量控制

将青皮药材指纹图谱与步骤(4)制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别所具有的共同吸收峰的数量，确定相似度。

2.根据权利要求1所述的青皮药材指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤(2)供试品溶液的制备按照下述方法进行：

称取青皮药材粉末过四号筛0.2～1.5g，置锥形瓶中，精密加甲醇20～50ml，称重，超声提取20～45min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得青皮药材供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的青皮药材指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中总流速为1ml/min。

4.根据权利要求1所述的青皮药材指纹图谱检测方法，其特征在于所建立的青皮药材指纹图谱由17个共有指纹峰构成，所述指纹图谱的17个共有指纹峰的相对保留时间范围及相对标准偏差如下表2：

表2 指纹图谱17个共有指纹峰的相对保留时间及相对标准偏差