[发明专利]裂殖壶菌WZYU011及其生产凝乳酶的方法有效

专利信息
申请号: 201611266502.4 申请日: 2016-12-31
公开(公告)号: CN107245451B 公开(公告)日: 2020-05-22
发明(设计)人: 于欣君;汪钊;陈虹;葛佳炜 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12N9/58;C12R1/645
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 33201 代理人: 黄美娟;李世玉
地址: 310014 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 裂殖壶菌 wzyu011 及其 生产 凝乳 方法
【权利要求书】:

1.裂殖壶菌(Aurantiochytrium sp.)WZYU011,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:M 2016619,保藏日期为:2016年11月7日,保藏地址为中国武汉,武汉大学,邮编430072。

2.一种利用权利要求1所述裂殖壶菌WZYU011生产凝乳酶的方法,其特征在于所述方法为:将裂殖壶菌WZYU011接种至发酵培养基中,在25-35℃下,50-600rpm振荡培养,得到发酵液,将发酵液离心,弃细胞沉淀,得到含凝乳酶的粗酶液,将粗酶液分离纯化,获得凝乳酶;所述发酵培养基组成为:葡萄糖40-120g/L,酵母粉10-20g/L,蛋白胨5-20g/L,海盐20g/L,溶剂为水。

3.如权利要求2所述利用裂殖壶菌WZYU011生产凝乳酶的方法,其特征在于所述裂殖壶菌WZYU011接种前先进行斜面活化和种子扩大培养:(1)斜面培养:将裂殖壶菌WZYU011接种于斜面培养基上,25-35℃下培养1-3天;所述斜面培养基组成为:葡萄糖20g/L,酵母粉10g/L,蛋白陈5g/L,海盐20g/L,琼脂20g/L,溶剂为水,pH值为6;(2)种子培养:将斜面培养基上的菌体接入含种子培养基的三角瓶中,在25-35℃下,50-300rpm震荡培养1-3天,得到种子液;所述种子培养基组为:葡萄糖60g/L,酵母粉10g/L,蛋白陈5g/L,海盐20g/L,溶剂为水,pH值为6。

4.如权利要求3所述利用裂殖壶菌WZYU011生产凝乳酶的方法,其特征在于:将种子液接入含发酵培养基的发酵罐中,在25-35℃下,转速50-600rpm,通气量40-100L/min,溶氧量20-60%的条件下,培养时间1-6天,获得发酵液。

5.如权利要求4所述利用裂殖壶菌WZYU011生产凝乳酶的方法,其特征在于所述种子液以体积浓度1%-10%的接种量接种至发酵培养基。

6.如权利要求4所述利用裂殖壶菌WZYU011生产凝乳酶的方法,其特征在于所述发酵液在5000rpm,4℃下离心5min,获得粗酶液。

7.如权利要求4所述利用裂殖壶菌WZYU011生产凝乳酶的方法,其特征在于所述发酵培养基组成为:葡萄糖60g/L,酵母粉20g/L,蛋白胨10g/L,海盐20g/L,溶剂为水。

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