[发明专利]乳制品中糖皮质激素的检测方法

权利要求书

1.一种乳制品中糖皮质激素的检测方法，其特征在于，包括：

1)称取待测乳制品5.0g，加入15mL乙酸乙酯，涡旋1min，然后超声20min，在10000r/min下离心10min，取7.5mL上清液置于试管中，在40℃±2℃下用氮气吹干；

2)用0.5mL甲醇溶解，用5mL超纯水稀释后涡旋混匀，再加入5mL正己烷，涡旋混匀，在3000r/min下离心2min，弃去上层正己烷，下层溶液过反相固相萃取柱，所述反相固相萃取柱预先用3mL甲醇，3mL超纯水活化，等快干时用5mL水除杂，然后用真空泵抽干或用洗耳球吹干，加入6mL甲醇洗脱，然后用氮气在40℃±2下吹干，用1mL的15％乙腈水溶解，涡旋，经0.22μm微孔滤膜过滤后用于高效液相色谱-串联质谱法分析，

所述糖皮质激素为泼尼松、泼尼松龙、氢化可的松、甲基泼尼松、地塞米松、倍他米松和氟氢可的松；

所述待测乳制品为生乳、发酵乳、灭菌乳、调制乳、巴氏灭菌乳、含乳饮料或者冷冻饮品；

其中，所述质谱法采用下列条件：

电离方式：电喷雾电离，正离子，

毛细管电压：3.0KV，

锥孔电压：40V，

离子源温度：120℃，

锥孔反吹气流量：50L/h，

脱溶剂气温度：350℃，

脱溶剂气流量：500L/h，

电子倍增电压：650V，

扫描方式：多离子反应监测，

液相色谱条件流动相流动速度：0.4mL/min，

高效液相色谱采用下列条件：

流动相流动速度：0.4mL/min，

色谱柱柱温：35℃，

试液温度：4℃，

进样体积(V)：10μL，

流动相：A相，0.1％甲酸溶液；B相，乙腈溶液，

梯度洗脱：

时间(min)	流动相A％	流动相B％	梯度变化曲线
0	70	30	-
3.5	70	30	6
3.7	30	70	6
4.7	15	85	6
5.0	70	30	1

。