[发明专利]一种6-蝶呤基叶酸的合成方法

说明书

本发明提供了一种6‑蝶呤基叶酸的合成方法，包括如下步骤：(1)将化合物1蝶酸与化合物2谷氨酸二叔丁酯盐酸盐加入到二甲基甲酰胺中，在缩合剂和辅助试剂存在下搅拌，将反应液倒入水中，析出固体3叶酸二叔丁酯；(2)将固体3加入到DMF和NMP的混合液中，加入化合物4蝶呤甲基溴化物，搅拌反应，加水析出固体5蝶呤基叶酸二叔丁酯；(3)将所述的固体5用三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶液处理后脱去保护基，反应液处理、干燥后得到6‑蝶呤基叶酸(6)。本发明所述的6‑蝶呤基叶酸的合成方法用于制备叶酸杂质6‑蝶呤基叶酸的标准品，纯度可达70‑80％，用于有效检测叶酸杂质6‑蝶呤基叶酸。

技术领域

本发明属于精细化学品合成领域，尤其是涉及一种6-蝶呤基叶酸的合成方法。

背景技术

叶酸又名碟酰谷氨酸，B族维生素之一，是氨基酸、嘧啶和嘌呤代谢中单碳转移的载体，对核蛋白的合成起辅酶作用；同时，叶酸也是许多细胞内酶反应的辅酶；叶酸的缺乏，会导致dTMP的合成受到限制，使DNA合成受阻，而产生巨幼细胞贫血。目前的研究已经证实，妇女孕前或妊娠早期缺乏叶酸是神经管畸形发生的重要病因之一。叶酸与同型半胱氨酸代谢关系密切，对预防心脑血管疾病的发生具有重要的生物学意义。而且，也有研究表明，叶酸与许多癌症的发生、预防以及治疗相关。

植物和微生物可在体内从头合成叶酸，而动物则不能，对人类而言，植物是人类最主要的叶酸来源。研究表明，世界上大多数国家的人群叶酸的摄入量都不理想，因此，利用基因工程改造植物，使其体内叶酸含量显著提高，就成为解决世界范围内叶酸缺乏症的最新选择。

四氢叶酸(THF)及其衍生物通常都称为叶酸，叶酸分子由喋呤、对氨基苯甲酸(PABA)和谷氨酸三部分组成。在不同的氧化条件下一碳单位连接于喋呤的N-5位置或是对氨基苯甲酸的N-10位置,或是连接在二者之间。通常人们所说的叶酸为L-构型(L-Folicacid)，叶酸杂质包括D-叶酸(D-Folic acid)、叶酸杂质-E(6-蝶呤基叶酸，6-PterinylFolic Acid)、高叶酸(Homofolic acid)、异高叶酸(Isohomofolic acid)等，在检测叶酸时要确定含有哪些杂质，以及准确的测量出叶酸中的杂质和每种杂质的含量，因此，必须要提供杂质标准品。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提出一种6-蝶呤基叶酸的合成方法，制得一种叶酸杂质的高纯度标准品，以便准确、有效的检测出叶酸中该种杂质的含量。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种6-蝶呤基叶酸的合成方法，包括如下步骤：

(1)将化合物1蝶酸与化合物2谷氨酸二叔丁酯盐酸盐加入到二甲基甲酰胺(DMF)中，加入缩合剂和辅助试剂，在室温搅拌过夜，将反应液倒入蒸馏水中，析出的固体经过滤，用蒸馏水洗涤，得到固体粗品，滤液用乙酸乙酯萃取，干燥，除去溶剂，得到固体粗品，将两部分固体合并，真空干燥，得粗品化合物3；

(2)将所述的粗品化合物3加入到二甲基甲酰胺(DMF)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)的混合液中，然后加入化合物4蝶呤甲基溴化物，混合物于室温至60℃搅拌4-48小时，反应液冷却至室温后倒入蒸馏水中，析出的固体经过滤，蒸馏水洗涤，干燥得棕色固体化合物5；

(3)将所述的棕色固体化合物5溶于三氟乙酸(TFA)和二氯甲烷(DCM)的混合溶剂中，混合物于室温搅拌1-12小时，脱去叔丁基保护基团，将溶剂浓缩至约5ml，在搅拌下缓慢加入蒸馏水，析出棕色固体，固体经过滤，蒸馏水洗涤，真空干燥后重新溶解于三氟乙酸中，再次加入蒸馏水，析出的固体经过滤、蒸馏水洗涤，真空干燥后得到棕色固体6-蝶呤基叶酸；

其化学方程式为：