[发明专利]提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物生物技术领域。更具体地说，本发明涉及一种提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法。

背景技术

罗汉果(Siraitia grosvenorii)为中国特有的珍贵药用和甜料植物。其果实性凉、味甘，具有清热润肺，利咽开音，滑肠通便和抗癌等功效，活性成分甜苷V为世界上最强的非糖甜味物质之一，是蔗糖甜度的300-400倍，广泛应用于食品、保健品和药品中，是糖尿病人、肥胖者和高血压患者的理想糖替代品。研究发现，罗汉果醇是甜苷V生物合成的中间产物，在罗汉果果实发育后期，罗汉果醇被完全消耗殆尽转化成甜苷V，然而，罗汉果醇只存在占果重不足15％的果肉内，且含量极低，严重制约了罗汉果产业的健康发展。

茉莉酸甲酯广泛地存在于植物体中，外源应用能够激发防御植物基因的表达，诱导植物的化学防御，产生与机械损伤和昆虫取食相似的效果。现有技术中未见有茉莉酸甲酯提高罗汉果醇含量的报道。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，其能够有效提高罗汉果醇的产量，具有见效快、成本低、操作简单、方便实施、产品无毒无残留等优点，以满足罗汉果醇的大规模生产，具有较强的实用性和推广价值。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，在罗汉果组培过程或栽培过程中施加茉莉酸甲酯。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，组培过程中，将罗汉果组培苗接种在含有茉莉酸甲酯的MS固体培养基中，置于相对湿度60～66％、光照强度1300～1500Lux、光照时间8h/d、温度21～25℃条件下培养28～31d，其中，茉莉酸甲酯的添加量为50～400μmol/L。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，栽培过程中，将茉莉酸甲酯配成浓度为50～400μmol/L的茉莉酸甲酯溶液，罗汉果授粉20～30d后，每天喷洒茉莉酸甲酯溶液于罗汉果表面，至表面滴水为止，早、中、晚各喷洒一次，连续喷施8～12d。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，包括：

步骤一、将罗汉果组培苗接种在含有茉莉酸甲酯的MS固体培养基中，置于相对湿度60～66％、光照强度1300～1500Lux、光照时间8h/d、温度21～25℃条件下培养28～31d，其中，茉莉酸甲酯的添加量为50～400μmol/L；

步骤二、将步骤一培养后的组培苗移栽至田间，罗汉果授粉20～30d后，每天喷洒浓度为50～400μmol/L的茉莉酸甲酯溶液于罗汉果表面，至表面滴水为止，早、中、晚各喷洒一次，连续喷施8～12d。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，用体积分数为2％的乙醇水溶液溶解茉莉酸甲酯，配制成浓度为50mmol/L茉莉酸甲酯的乙醇母液，并用0.22μm的微孔滤膜灭菌，将灭菌后的茉莉酸甲酯的乙醇母液添加到MS固体培养基中，至茉莉酸甲酯浓度为50～400μmol/L，灭菌并冷却至24～26℃，其中，MS固体培养基包括：MS、1.5mg/L6-苄氨基腺嘌呤、0.3mg/L吲哚丁酸、3.5g/L琼脂、30g/L蔗糖、以及1.0g/L活性炭。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，用体积分数为2％的乙醇水溶液溶解茉莉酸甲酯，配制成浓度为50～400μmol/L的茉莉酸甲酯溶液。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，MS固体培养基还包括调节剂，调节剂的添加量为5μmol/L，调节剂包括质量比为2:1:0.2的竹醋液、扯根菜水提物、香豆素。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，组培过程包括两阶段，第一阶段培养15d，每隔3～5d更换一次MS固体培养基，被更换的MS固体培养基加热至熔化为液态混合物，将海绵浸泡在液态混合物中充分吸收，然后覆盖在更换的MS固体培养基上方，直至下次更换培养基时移除并更换；第二阶段培养15d，每隔5～7d更换一次MS固体培养基，每次更换后的第2d对接种有组培苗的MS固体培养基进行雾化处理，雾化剂为质量分数为1％的酪蛋白溶液。

优选的是，所述的提高罗汉果中罗汉果醇含量的方法，授粉后每隔5d喷施促进剂，促进剂包括质量比为3:3:2:0.1:0.1:10的赤霉素、萘乙酸、吲哚乙酸、芹菜素、复合维生素B以及皂角米蛋白，皂角米蛋白的制备方法为：将皂角米溶解于碱液中，震荡、离心、分离，上清液即得皂角米蛋白。