[发明专利]一种筛选新型脂肪酸合成抑制剂的方法

权利要求书

1.一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：以产油微生物为工具，经过培养活化后，等量加入微孔板中，同时在相应的微孔中加入脂质染色剂以及所要筛选的抑制剂，培养一段时间后观察并用图像分析软件以及分光光度计或酶标仪对微孔显色结果进行分析，染色越浅的微孔对应的脂肪酸合成抑制剂的抑制效果越好。

2.根据权利要求1所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：所述的方法包括如下步骤：

1)产油微生物活化培养，并用打碎机打匀菌液；

2)将步骤1)中所述活化的菌液等量加入微孔板中，在实验组中等量加入将要筛选的抑制剂，在对照组和实验组中等量加入染色剂；

3)将步骤2)中所述微孔板中的菌体培养72小时后肉眼观察结果，将有明显颜色变化的筛选抑制剂用图像分析软件及酶标仪对显色结果进行分析，染色越浅的微孔对应的脂肪酸合成抑制剂的抑制效果越好。

3.根据权利要求2所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：还包括步骤4)将筛选出的抑制剂加入菌体培养基培养菌体，检测生物量、蛋白量的变化，检测抑制剂对菌体正常生长情况的影响。

4.根据权利要求1或2所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：所述产油微生物是高山被孢霉、裂殖壶菌、卷枝毛霉中的至少一种。

5.根据权利要求2所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：步骤2)中设计对照组与实验组，对照组为只加菌液和只加菌液、染色剂的微孔，实验组为加入菌液、抑制剂和染色剂的微孔。

6.根据权利要求1或2所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：所述的脂质染色剂为TTC(2，3，5—氯化三苯基四氮唑)，脂肪酸含量越少，TTC与脂肪酸反应产生的红色TF物质越少，即红色越浅。

7.根据权利要求6所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：加入微孔TTC的质量与液体培养基的体积之间的百分比为0.05％～0.5％。

8.根据权利要求1或2所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：加入微孔的脂肪酸抑制剂的量根据其性能强弱及降解能力添加。

9.根据权利要求2所述的一种筛选脂肪酸合成抑制剂的方法，其特征在于：所使用的图像分析软件可以是image j，Adobe Photoshop CS6中的至少一种。