[发明专利]FOXL2启动子基因的重组与构建的模型及应用有效
| 申请号： | 201611245081.7 | 申请日： | 2016-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN106754929B | 公开（公告）日： | 2018-01-19 |
| 发明（设计）人： | 韩阳阳;唐胜建;刘俊;马丽敏 | 申请（专利权）人： | 潍坊医学院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业)37240 | 代理人： | 李茜 |
| 地址： | 261061 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | foxl2 启动子 基因 重组 构建 模型 应用 | ||
1.一种FOXL2 启动子模型，其特征在于，将含有 FOXL2 启动子序列和荧光素酶报告基因的重组质粒转染到人宫颈癌细胞（Hela）中，构建 Hela 细胞 FOXL2 启动子模型，所述的FOXL2 启动子序列为Seq NO.1：
cagggattct gcggaagtgc tgcttccccc atgtctgttg ggtgcagtgg gagaccgccc
ataaaaaaaa ccaagctact ttggggatag ccttgctccc tctcatcctt gtgaccaggc
aagggctgcc ctgctgacct ctctggtgtc atcttcaaga tgctgaattc caaagagccc
taccaccctt gtcctccctc cctttcatct cagaatgcag atcagaggcc tgagtgagca
gcagacaaca cttgtagatg gcctgtggat gctggaacca caggccgctg aaggctcctt
gggcttcagg agaaccctca gagtctaaac agcctgggag gaagaggcag tgacaggcat
tgagtcagcc actccagaca tgccaatcac taatgcacag ctatatgaca tccattcagt
ccaccttcct ccataaggtg gccttgcccc cctcctcagc accaaggagt ttggggcttg
aggattcaaa acactggcca tctctctcat actttatgac tgcagacttt ttgtttaggc
caagttaaaa ggcactgtta aggagcacac tgttaaaagg cacacctgat tttccctgaa
acaatctctg tacatgctga aataattgga ttcccatcag aattctgctt aaggtaggtg
acaactaact cctgattctt tggagaaaga tcagaacaaa tgtctcatca ggagagagat
ttgaacaagt ccctccctca gcctgatgtt tgtcttccca gtctgtggca aaatacatac
actgggaggg aaagaggcat cgaagaattg tgaaagaaag gaagaaaggg gggaaggaaa
gaagtaagaa aggagaaaaa gagaagatgc tatatccacc agctacattt actctaatac
ttgatgaaca tattacataa ctatcagtat aagtgtgttt tacctcgtaa atacaaatct
cacaccttgt acatgtgcat acctgtgttt ctgagcagca cacatgcacc tggtatctca
cccatctcaa ggacagctcc tctccatgac ttccatatgt gacccctgtg cacacacata
cacagtcccg caaagtcccg ggcaacagcc ccgcctgtgt tagtgcaata gctgaggggc
atctacttgg tgctgttaaa gcacacatcc aaccttcact ccaaccccgt aggattagta
cacggattcc tggttcctag atccactggt aacgcaggga gaggcagagg tgattcaggc
ggcgcccctg acgactattt ccagagatcc tctcccctgc cccattccag cccagtcact
ctgagagcgc gagggacagg ccaggccgag gcttcttcgt acagtcacac ccgtttctgg
gctgactttc ccaaagcctc agagcagctc tccccaccct accccgtcca gccccctcgc
cgtctcgccc ctccccagcc ccgagctaga agttcagcct caagacggca gcaaacggca
gagcaaagga gtcgttttct ttcacctgaa agccgcgagg aggcttggag cgcctttcct
cgctggggcc cgagcttcct gggctttggc cgggtgcggg cagaccccac cggggtcctc
gtcatctccc agcccagccc gcagagcgag taccggcaga tttcaagggc gcgtgagcct
ggctgtcggc tgggcccctg aggctcgctg ggcgggggca ggccggtcca ggctgtgcgg
ggcgtttaca aaaagtgact tggagatgaa ctcgcccgtg cgcggctggc cgccccgcta
taggggcgaa ggcgcctgac gcaagcggaa ctcggtggag cccatacgaa tcagaacaga
gcgaggctcc tggcgcacta gggactccag gaggcagctc cgccagagac gcgggtcgtg
cttcgggaaa c；
用PrimerPremier 5.0 设计扩增 FOXL2 启动子的引物，以正常的人类基因组为模板进行 PCR，将扩增得到的FOXL2 启动子片段构建 proFOXL2-pMD19-T 载体，经过双酶切鉴定并测序后，将片段亚克隆到 pGL3-basic 和 pGL3-enhancer 载体上，构建proFOXL2-Basic 和 proFOXL2-Enhancer 重组质粒，经过双酶切鉴定和测序验证，实现了 FOXL2 启动子-luc 表达载体的重组。
2.如权利要求1所述的FOXL2启动子模型在筛选抑制宫颈癌细胞生长药物中的应用。
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