[发明专利]利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法

权利要求书

1.利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，选取30-40只水蛭放入烧杯中，向烧杯中加水直至水深达到4-5cm，再向水中滴加5-10ml花生油，搅拌均匀后静置饥饿处理7-8天，再将处理后的水蛭取出，将所得到的水蛭和甘油质量比为1:(4-6)进行混合后放入超声振荡仪，以150-200W功率超声振荡40-60min，过滤分离去除滤渣，得到备用液A，

步骤二，将步骤一所得到的备用液A置于容器内，往容器内添加维生素8-10g，调整pH 5.0-7.0，灭菌后，得到备用液B，

步骤三，将备用液B装进装有TB培养基的发酵罐中，发酵罐中装有TB培养基，然后加入乳糖，使乳糖浓度达到4-6mg/ml，然后无氧发酵50-80h，获得发酵液，过滤备用，

步骤四，将步骤三所得到的发酵液加蜂蜜3-8g进行调味，即得水蛭素。

2.根据权利要求1所述的利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，其特征在于，所述TB培养基由蛋白胨10-12g、酵母提取物10-15g、甘油4-6ml组成，各组分溶解后高压灭菌，冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mol/L的磷酸二氢钾和0.72mol/L磷酸氢二钾的溶液。

3.根据权利要求1所述的利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，其特征在于，所述步骤二中维生素为维生素A、维生素C、维生素H、维生素PP和维生素T的混合物。

4.根据权利要求1所述的利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，其特征在于，所述步骤二中维生素为维生素A、维生素C、维生素H、维生素PP和维生素T的质量比为(1-2)：(2-3)：(1-2)：(1-3)：(3-4)。

5.根据权利要求1所述的利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，其特征在于，所述步骤一中饥饿处理的温度控制在80-90℃。

6.根据权利要求1所述的利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，其特征在于，所述步骤三无氧发酵的温度为32-40℃。

7.根据权利要求1所述的利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，其特征在于，步骤一，选取33-38只水蛭放入烧杯中，向烧杯中加水直至水深达到4.3-4.8cm，再向水中滴加6-8ml花生油，搅拌均匀后静置饥饿处理7.3-7.8天，再将处理后的水蛭取出，将所得到的水蛭和甘油质量比为1:(5-6)进行混合后放入超声振荡仪，以170-200W功率超声振荡45-55min，过滤分离去除滤渣，得到备用液A。

8.根据权利要求1所述的利用微生物发酵催化制备水蛭素的方法，，其特征在于，步骤一，选取35只水蛭放入烧杯中，向烧杯中加水直至水深达到4.5cm，再向水中滴加7ml花生油，搅拌均匀后静置饥饿处理7.5天，再将处理后的水蛭取出，将所得到的水蛭和甘油质量比为1:5进行混合后放入超声振荡仪，以180W功率超声振荡50min，过滤分离去除滤渣，得到备用液A。