[发明专利]一种DNA免疫吸附剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种DNA免疫吸附剂及其制备方法。该制备方法包括如下步骤：1)含有醛基的聚苯乙烯基大孔吸附树脂的制备：2)DNA配基接枝固载。通过该方法制备的DNA免疫吸附剂直接采用大孔吸附树脂作为载体，用大孔吸附树脂替代活性炭或碳化树脂，由于生产过程中减少了炭化和活化工艺，保留了树脂骨架的韧性，大幅降低了微粒脱落的风险；另外，本发明采用化学接枝法，直接将DNA配基固载到大孔吸附树脂上，通过化学键连接的DNA配基固载牢固，不易脱落；此外，由于没有火棉胶等包膜材料的包埋和掩盖，固载在树脂表面及孔道内部的DNA可以发挥出最大的吸附作用。

技术领域

本发明涉及血液净化领域，具体涉及一种能用于吸附系统性红斑狼疮患者体内致病物质的DNA免疫吸附剂及其制备方法。

背景技术

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种较常见的累及多系统多器官的自身免疫性疾病。由于体内有大量致病性自身抗体和免疫复合物而造成组织损伤，临床上可出现各个系统和脏器损伤的表现，如皮肤、关节，浆膜、心脏、肾脏，中枢神经系统、血液系统等等，该病在世界范围内均有出现，患病率为4/10万～25/10万，亚洲及黑人患病率较高，我国的患病率为70/10万～75/10万。女性发病明显多于男性，约为10∶1，育龄妇女为发病高峰，老人及儿童也可患病。其中，抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)是参与SLE发病的主要抗体，其特异性可达90％，是SLE特异性抗体。

近年来，在血浆置换基础上发展了一种新的疗法，即免疫吸附。这是通过吸附除去内源性和外源性致病因子，净化血液，从而达到治疗目的。免疫吸附是通过抗原抗体免疫反应或物理化学作用除去致病因子，主要是血浆吸附，从而避免了离心式和一次膜血浆分离大量丢弃血浆的弊端，因此利用血液直接吸附和血浆吸附，能特异地选择性地吸附血浆中特定的病因物质。

根据吸附剂与被吸附物质之间的作用原理，可以将吸附剂分为生物亲和型和物化亲和型。前者包括：①抗原固定型：将抗原固定在载体上，吸附除去相应的抗体或免疫复合物；②抗体固定型：将抗体固定在载体上，吸附除去相应的抗原；③补体固定型：将C1q固定在载体上，吸附除去免疫复合物；④蛋白A固定型：将蛋白A固定在载体上，吸附除去相应的免疫球蛋白；后者包括：①静电结合型：通过吸附剂和被吸附物之间的静电作用而相互结合；②疏水结合型：靠吸附剂侧链的疏水基团与被吸附物之间的疏水作用力而结合。

其中应用比较广泛的是DNA免疫吸附，采用免疫吸附疗法可以特异性的吸附和清除抗ds-DNA抗体，从而对SLE患者进行有效的治疗。

欧洲专利EP 0272792A1披露了基于活性炭或者碳化树脂的DNA免疫吸附剂制备方法，它们以活性炭或碳化树脂为载体，以小牛胸腺DNA为配基，利用火棉胶包膜固载DNA。但是，无论是活性炭还是碳化树脂，均存在碳颗粒易脱落的问题，即使通过火棉胶包膜，仍然无法解决微粒脱落的问题，因而使用之前需要增加时间进行充分预冲至无微粒，从而避免治疗时微粒随血液循环进入人体而导致发生血栓、过敏、刺激等严重的不良反应；此外，DNA采用火棉胶包埋方式固载还存在两个缺点：(1)部分DNA会由于包埋不充分，在后续生产过程中可能发生脱落，导致DNA固载量下降；(2)部分被包埋过深的DNA又无法与抗体接触；无论是DNA固载量下降还是包埋过深都会影响吸附剂的吸附性能。

因此，提供一种吸附性能好的，微粒脱落率低的DNA免疫吸附剂成为亟待解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的首要技术问题在于提供一种新型DNA免疫吸附剂的制备方法。该方法直接采用大孔吸附树脂作为载体，更安全、更有效、同时生产工艺更为简单。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供一种根据上述方法制备的DNA免疫吸附剂。

为了实现上述发明目的，本发明提供一种新型DNA免疫吸附剂的制备方法，包括如下步骤：

1)含有醛基的聚苯乙烯基大孔吸附树脂的制备：