[发明专利]一种DNA免疫吸附剂及其制备方法

权利要求书

1.一种DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1）含有醛基的聚苯乙烯基大孔吸附树脂的制备：

以乙烯基苯甲醛单体和苯乙烯类单体为原料，以多乙烯基单体为交联剂，再加入致孔剂和引发剂，混合均匀，制成混合有机相，将混合有机相加入到分散介质中，机械搅拌，待混合有机相在分散介质溶液中形成一定大小的均匀液滴后，进行悬浮聚合；反应结束后，水洗至水洗液澄清，用丙酮抽提12-36h，再水洗至无丙酮味，抽滤，得到含有醛基的聚苯乙烯基大孔树脂；

其中，所述乙烯基苯甲醛单体占单体总重量的5%-40%；

所述苯乙烯类单体占单体总重量的5-40%；

所述多乙烯基单体占单体总重量的55-80%；

所述致孔剂的用量为单体总重量的70%-250%；

所述引发剂的用量为单体总重量的0.5%-1.5%；

所述分散介质与混合有机相的体积比为1-3∶1；

所述分散介质由分散剂和水组成；其中分散剂占分散介质质量百分比为0.5%-2%；

具体操作时，悬浮聚合过程为：加热升温至70-75℃，聚合3-6小时，升温至78-82℃反应5-8小时，再升温至85-90℃，继续反应4-8小时后停止反应；

2）DNA配基接枝固载：

取小牛胸腺DNA溶解于0.2mol/L pH＝7.5-8.0的Tris-HCl缓冲溶液中，配制成浓度为0.5-2mg/mLDNA溶液，将步骤1）所得的含醛基的聚苯乙烯基大孔吸附树脂加入到相当于树脂质量1-5倍的上述DNA溶液中，在60-80℃下反应5-18h，得到接枝DNA配基的大孔吸附树脂。

2.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤1）所述含有醛基的聚苯乙烯基大孔树脂的粒径范围为0.4-2mm。

3.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤1）所述乙烯基苯甲醛单体为3-乙烯基苯甲醛或4-乙烯基苯甲醛中的一种或者两种。

4.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤1）所述苯乙烯类单体选自苯乙烯、甲基苯乙烯、乙基苯乙烯的一种或两种。

5.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤1）所述多乙烯基单体为二乙烯基苯或二乙烯基甲苯。

6.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤1）所述致孔剂为芳烃、高级醇、烷烃、酯类中的一种或两种或三种，其中，所述芳烃为甲苯或二甲苯，所述高级醇为丁醇、己醇或环己醇，所述烷烃为正庚烷，所述酯类为乙酸丁酯、乙酸乙酯或丁酸丁酯。

7.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤1）所述引发剂为有机过氧化物；所述分散剂为明胶、聚乙烯醇或羧甲基纤维素。

8.如权利要求7所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

所述有机过氧化物为过氧化苯甲酰、过氧化-2-乙基己酸叔丁酯或过氧化-2-乙基己酸叔戊酯。

9.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤1）所述含有醛基的聚苯乙烯基大孔树脂的比表面为300-1100m² /g、平均孔径为4-20nm，醛基含量为0.5-4mmol/g。

10.如权利要求1所述的DNA免疫吸附剂的制备方法，其特征在于：

步骤2）所得固载DNA配基的大孔吸附树脂中DNA的固载量为0.3-4mg/mL。

11.一种根据权利要求1-10中任意一项所述制备方法制备的DNA免疫吸附剂。