[发明专利]一种纯化脂肪酶的筛选方法在审
申请号: | 201611222135.8 | 申请日: | 2016-12-23 |
公开(公告)号: | CN107418940A | 公开(公告)日: | 2017-12-01 |
发明(设计)人: | 胡家富;蔡金燕;杨勇;刘玉东 | 申请(专利权)人: | 南京河海环境研究院有限公司 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210047 江苏省南京市六*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯化 脂肪酶 筛选 方法 | ||
1.一种脂肪酶的纯化方法,其特征在于按照下述步骤进行:
(1)萃取
本实验的双水相构成为萃取剂A(12%-16%)与萃取剂B(14%-22%),将2.0g的酶液加入刻度试管中,混匀静置,进行萃取反应。冰浴条件下,取上清液,在其中加入萃取剂C,混匀,低温静置。萃取结束后,收集离心管中水相。
(2)透析
采用8000-14000截留率的透析袋,在PBS 7.0冰浴下,对上清液进行透析。
2.根据权利要求1所述的一种纯化脂肪酶的方法,其特征在于:萃取剂A为硫酸铵、磷酸氢二钾、酒石酸钾钠、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的一种。
3.根据权利要求1所述的一种纯化脂肪酶的方法,其特征在于:萃取剂B为PEG1000、PEG2000、PEG4000、PEG6000的一种。
4.根据权利要求1所述的一种纯化脂肪酶的方法,其特征在于:萃取剂C为甲醇、丙醇、丁醇、二氯甲烷、石油醚。
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