[发明专利]一种测定金银花大鼠血清代谢产物的方法

权利要求书

1.一种测定金银花大鼠血清代谢产物的方法，其特征在于：包括对含有马钱酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异绿原酸C和槲皮素的大鼠血清进行前处理的步骤，向设定体积的大鼠血清中加入提取试剂，震荡、离心后，取上清液，并向上清液中加入内标物和吸附萃取剂，震荡萃取、离心，取上清液过固相萃取小柱，流出液经过滤后待检；

其中，每毫升大鼠血清所用的吸附萃取剂由以下组分组成：C18 3.5～4.5mg、PSA 1.7～2.1mg和GCB 1.8～2.2mg。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：每毫升大鼠血清所用的吸附萃取剂由以下组分组成：C18 4mg、PSA 2mg和GCB 2mg。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述固相萃取小柱为Cleanert MAS-WA固相萃取小柱。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述内标物为黄芩苷。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述提取试剂为甲醇和乙腈的混合溶液，两者的体积比为1:0.8～1.2。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：大鼠血清与提取试剂的料液比为1:4～5.5。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：震荡萃取的时间为1.5～2.5min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：还包括对前处理过的大鼠血清进行RRLC-ESI-MS-MS检测的步骤；

色谱条件为：色谱柱Agilent XDB C18，4.6×50mm，1.8μm；柱温30℃；进样量5μL；流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱，梯度洗脱程序为：0-8min，5-60％乙腈；8-10min，60-90％乙腈；流速0.5mL/min；后运行时间7min。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：质谱条件为：离子源为ESI源，负离子模式检测，扫描方式为多反应监测，电喷雾电压4000V，离子源温度为325℃，干燥气流速为12.0mL/min，雾化气压力为35psi，离子选择见下表：

10.权利要求1～9任一所述测定金银花大鼠血清代谢产物的方法在测定金银花在大鼠血清代谢产物含量中的应用。