[发明专利]一种中药饮片枳壳中黄酮苷类化合物的分离检测方法

权利要求书

1.一种中药饮片枳壳中黄酮苷类化合物的分离检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)称取中药饮片枳壳，粉碎，采用加热回流的方式提取，得到粗提取物；

(2)将步骤(1)中粗提取物中，加入甲醇后超声处理，过滤，得到滤液；

(3)采用高效液相色谱法对步骤(2)中制备得到的滤液进行分离；

其中，所述高效液相色谱法的固定相填料为硅胶类填料；

所述高效液相色谱法的固定相填料为壳聚糖改性硅胶填料，或者，所述高效液相色谱法所用色谱柱的固定相填料为壳聚糖衍生物改性硅胶；

所述壳聚糖改性硅胶填料的制备方法为：将3mo1/L盐酸中浸泡8g硅胶，并加热回流10h，然后用二次蒸馏水洗至中性，用丙酮洗三次，在150℃下烘烤除水活化8h，冷却后保存于干燥器中备用；取6.0g经活化的干燥硅胶，加入100mL无水干燥甲苯，搅拌下加入4.0mLKH-560和3滴三乙胺催化剂；在N₂保护下加热回流26h，冷却，用甲苯抽提20h，依次用丙酮、甲醇和丙酮洗涤，80℃下真空干燥8h，得到偶联剂键合硅胶物质，制备得到硅胶前体；称取硅胶前体10g，加热搅拌下，向其中加入壳聚糖，乙酸、甲苯；滴加2滴高氯酸用作催化剂，在N₂保护下加热回流24h，冷却，调节PH至中性，析出固体，即得壳聚糖改性硅胶；

所述壳聚糖衍生物改性硅胶填料的制备方法为：将3mo1/L盐酸浸泡硅胶，并回流10h，然后用二次蒸馏水洗至中性，用丙酮洗三次，在160℃下烘烤除水活化8h，冷却后保存于干燥器中备用；取6.0g经活化的干燥硅胶，加入100mL无水干燥甲苯，搅拌下加入4.0mL KH-560和3滴三乙胺催化剂；在N₂保护下加热回流24h，冷却，用甲苯抽提24h，依次用丙酮、甲醇和丙酮洗涤，80℃下真空干燥8h，得到偶联剂键合硅胶物质，制备得到硅胶前体；称取硅胶前体5g，加热搅拌下，向其中加入1.5g壳聚糖衍生物，乙酸、甲苯；滴加2滴高氯酸用作催化剂，在N₂保护下加热回流24h，冷却，调节PH至中性，析出固体，即得壳聚糖衍生物改性硅胶；

所述黄酮苷类化合物为异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷；

所述高效液相色谱法的流动相包括水相和有机相；

所述有机相选自甲醇或乙腈中的任意一种；

所述水相选自甲酸溶液或纯水中的任意一种；

所述有机相与水相的体积比为30：70～20：80；

所述中药饮片枳壳中黄酮苷类化合物的分离检测方法中检测波长为245～285nm。

2.根据权利要求1所述的中药饮片枳壳中黄酮苷类化合物的分离检测方法，其特征在于，所述甲酸溶液的摩尔浓度为0.1％～0.5％。

3.根据权利要求2所述的中药饮片枳壳中黄酮苷类化合物的分离检测方法，其特征在于，所述甲酸溶液的摩尔浓度为0.2％～0.4％。