[发明专利]一种姬玉露的离体快速繁殖方法

说明书

本发明涉及姬玉露的离体快速繁殖方法，可有效解决姬玉露常规繁殖方法周期较长，受自然环境影响较大，很难满足市场上对姬玉露的需求问题，其解决的技术方案是，包括以下步骤：1）外植体表面灭菌；2）愈伤组织的诱导；3）芽的诱导；4）芽增殖；5）生根；6）驯化移栽。本发明方法简单易行，可以在短时间内大大提高其繁殖效率，为姬玉露工厂化生产提供前期的技术支持，不受自然界环境影响的特点，可以用于姬玉露大规模的快速繁育，同时也为其他多肉植物的研究提供一定的参考，是姬玉露繁殖方法上的创新。

技术领域

本发明涉及一种生物技术中植物组织培养的方法，特别是一种姬玉露的离体快速繁殖方法。

背景技术

姬玉露(Haworthia cooperi v.truncata)花如其名，小巧、通透、色泽淡雅，是百合科十二卷属中很可爱的多肉植物，在家中、办公室等场所用作小盆栽点缀，不仅赏心悦目，而且可净化空气。近几十年来，因其本身极强的观赏性、顽强的生命力，以及互联网的发达等客观条件，姬玉露已经成为人们争相收藏与养护的多肉植物，被人们形象的称为“有窗植物”。但是由于姬玉露本身生长极其缓慢，环境条件要求严格，因此养护成本高，植株价格昂贵，并且目前多肉植物的研究也相对滞后。目前姬玉露的繁殖主要依靠分株繁殖，种子繁殖虽然也是其常用的的繁殖方法之一，但是要通过人工授粉，方能获取种子。且这些常规繁殖方法周期较长，受自然环境影响较大。很难满足市场上对姬玉露的需求。为克服以上存在的问题，采用组织培养技术加快姬玉露的繁殖与生长，降低成本，那么姬玉露的观赏价值会得到充分的展现，人们也可以感受到它带来的喜悦心情与健康环保，目前尚未见有关姬玉露的离体快繁方法的报道。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种姬玉露的离体快速繁殖方法，可有效解决姬玉露常规繁殖方法周期较长，受自然环境影响较大，很难满足市场上对姬玉露的需求问题。

本发明解决的技术方案是，包括以下步骤：

1)外植体表面灭菌：以姬玉露的叶片为外植体，将0.05-0.1g肥皂，溶解到150-200ml的自来水中制作成肥皂水，然后把姬玉露的叶片在肥皂水中浸泡15min，至流水下冲洗2h，将冲洗干净的姬玉露叶片在无菌操作台上，用体积浓度为75％的酒精表面消毒30s，再用质量浓度为0.1％的HgCL₂(氯化汞)表面消毒7min，最后用无菌水冲洗5-7次；

2)愈伤组织的诱导：将经过表面灭菌的叶片外植体在无菌操作台上切成0.3cm²-0.6cm²的小块，放入经过高压灭菌的培养基中，每瓶培养基为50ml，每瓶放入5块外植体，在培养室内温度23-27℃、光照强度1500～2000lx、光照时间12h/d下进行培养，培养30d后统计愈伤组织的诱导率；所述的培养基是由：每1000ml的1/2MS(MS培养基中的大量元素减半，铁盐、微量元素、维生素不减，MS培养基的具体配方用量见附表)培养基中加入6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)1-3mg和NAA(萘乙酸)0.2-2mg制成；

3)芽的诱导：将诱导出的愈伤组织，转入每1000ml的MS培养基中加入6-BA 0.3-3mg和NAA 0.1-1mg制成的培养基中诱导分化，每瓶培养基装量为50ml，每瓶放入5块愈伤组织，培养室内温度23-27℃、光照强度1500～2000lx、光照时间12h/d下进行芽的诱导；30d后统计不定芽的诱导率；

4)芽增殖：将具不定芽的愈伤组织切割成若干块，每块具2-3个不定芽，转入每1000ml的MS培养基中加入6-BA 0.5-1mg和NAA 0.05-0.2mg制成的增殖培养基中，每瓶增殖培养基装量为50ml，每瓶放入5块，培养室内温度23-27℃、光照强度1500～2000lx、光照时间12h/d下进行培养，30d后统计不定芽的增殖倍数；