[发明专利]一种姬玉露的离体快速繁殖方法

权利要求书

1.一种姬玉露的离体快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）外植体表面灭菌：以姬玉露的叶片为外植体，将0.05-0.1g肥皂，溶解到150-200ml的自来水中制作成肥皂水，然后把姬玉露的叶片在肥皂水中浸泡15min，至流水下冲洗2h，将冲洗干净的姬玉露的叶片在无菌操作台上，用体积浓度为75%的酒精表面消毒30s，再用质量浓度为0.1% 的HgCL₂表面消毒7min，最后用无菌水冲洗5-7次；

2）愈伤组织的诱导：将经过表面灭菌的叶片外植体在无菌操作台上切成0.3cm²-0.6cm²的小块，放入经过高压灭菌的培养基中，每瓶培养基为50ml，每瓶放入5块外植体，培养室内温度23-27℃、光照强度1500～2000lx、光照时间12 h/d下进行培养，培养30d后统计愈伤组织的诱导率；所述的培养基是由：每1000ml的1/2MS培养基中加入6-BA 1-3 mg和NAA0.2-2mg制成；

3）芽的诱导：将诱导出的愈伤组织，转入每1000ml的MS培养基中加入6-BA 0.3-3mg和NAA 0.1-1mg制成的培养基中诱导分化，每瓶培养基装量为50ml，每瓶放入5块愈伤组织，培养室内温度23-27℃、光照强度1500～2000lx、光照时间12h/d 下进行芽的诱导；30d后统计不定芽的诱导率；

4）芽增殖：将具不定芽的愈伤组织切割成若干块，每块具2-3个不定芽，转入每1000ml的MS培养基中加入6-BA 0.5-1mg和NAA 0.05-0.2mg制成的增殖培养基中，每瓶增殖培养基装量为50ml，每瓶放入5块，培养室内温度23-27℃、光照强度1500～2000lx、光照时间12 h/d 下进行培养，30d后统计不定芽的增殖倍数；

5）生根：增殖后的芽培养一段时间，长成1-2cm高时，切割成单芽，转入每1000ml的1/2MS培养基中加入6-BA 0.005-0.01 mg和NAA0.05- 0.2mg制成的生根培养基中，每瓶生根培养基装量为50ml，每瓶放入5个芽，培养室内温度23-27℃、光照强度1500～2000lx，光照时间12 h/d，6-7d即可成较粗壮的根，15d后统计其生根率；

6）驯化移栽：幼苗长到2-3cm高时，打开瓶盖炼苗4～5d后取出，洗净根部琼脂后，栽入不同基质，覆盖塑料薄膜保湿，待其长出新根，移到苗床上即可。