[发明专利]多肽探针、包含该探针的试剂盒及其应用有效
申请号: | 201611209386.2 | 申请日: | 2016-12-23 |
公开(公告)号: | CN106632689B | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 杨用;梁岩 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12Q1/37;C12Q1/02 |
代理公司: | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人: | 曹卫良 |
地址: | 518000 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多肽 探针 包含 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种多肽探针,其特征在于,所述多肽探针选自下列物质:
X1-Y1-CC;
所述X1的氨基酸序列为asaaeleervktlkaeiyelrskanmlreqiaqlgap;所述X1的全部或部分氨基酸为D构型氨基酸;
所述Y1的序列为DEVD。
2.根据权利要求1所述的多肽探针,其特征在于,所述多肽探针的N端进行了乙酰化修饰;
和/或;
所述多肽探针的C端进行了酰胺化修饰。
3.根据权利要求1所述的多肽探针,其特征在于,所述X1与所述Y1之间通过第一连接子和/或所述Y1与所述CC之间通过第二连接子。
4.根据权利要求3所述的多肽探针,其特征在于,所述第一连接子的氨基酸数目为1~5个。
5.根据权利要求3所述的多肽探针,其特征在于,所述第二连接子的氨基酸数目为1~5个。
6.根据权利要求3~5任一项所述的多肽探针,其特征在于,所述第二连接子的氨基酸序列为G。
7.一种诊断试剂盒,其包括权利要求1~6任一项所述的多肽探针、双砷染料、待检测酶切割所述多肽探针得到酶切产物时所用的缓冲液1以及所述双砷染料对所述酶切产物进行标记时所用的缓冲液2。
8.根据权利要求7所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述缓冲液1含有用于避免二硫键出现的还原剂。
9.根据权利要求8所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述还原剂选自二硫苏糖醇和/或三(2-羰基乙基)磷盐酸盐。
10.根据权利要求8所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述还原剂选自二硫苏糖醇,且所述还原剂的浓度为0.5~2mM。
11.根据权利要求7所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述缓冲液2为含有用于避免单个所述CC片段与所述双砷染料结合的洗脱剂。
12.根据权利要求11所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述洗脱剂选自2,3-二巯基-1-丙醇和/或1,2-乙二硫醇。
13.根据权利要求11所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述洗脱剂选自2,3-二巯基-1-丙醇,且所述洗脱剂的浓度为0.03~0.10mM。
14.根据权利要求11所述的诊断试剂盒,其特征在于,所述双砷染料选自ReAsH-EDT2、FlAsH-EDT2、F2FlAsH或F4FlAsH中的一种或多种。
15.权利要求1~6任一项所述的多肽探针或权利要求7~14任一项所述的诊断试剂盒在检测半胱氨酸蛋白酶-3和/或半胱氨酸蛋白酶-7活性中的应用。
16.根据权利要求15所述的应用,其特征在于,所述检测在细胞裂解液或在体细胞中进行。
17.根据权利要求16所述的应用,其特征在于,所述细胞选自HeLa细胞、NIH/3T3细胞、C6细胞、MCF7细胞、人HCE细胞、Jurkat T细胞、Huh-7细胞、DU145细胞、U-937细胞以及HepG2细胞中的任一种。
18.权利要求1~6任一项所述的多肽探针或权利要求7~14任一项所述诊断试剂盒在制备用于评价和/或治疗细胞凋亡相关疾病的药物中的应用。
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